性別相關候選Dmrt基因在香魚(Plecoglossus altivelis)不同發(fā)育階段和組織中的表達.pdf

1、香魚(Plecoglossus altivelis)屬胡瓜魚目、鮭亞目、香魚科、香魚屬，為一種名貴的小型洄游性魚類，是我國東南沿海地區(qū)和日本的重要淡水養(yǎng)殖品種之一。但香魚雌性生長性狀要優(yōu)于雄性，生長速度快、個體較大，市場價格比雄魚高兩倍多。因此開展香魚性別相關基因的研究具有重要的理論和實踐意義。Dmrt1和 Dmrt5基因是性別相關基因家族—Dmrt基因家族中的重要成員，具有潛在的性別調控作用。
　　本實驗從香魚性腺轉錄組內篩選到

2、Dmrt基因家族成員中的Dmrt1和Dmrt5的部分序列，并通過設計特異性引物驗證和RACE技術獲得Dmrt1和Dmrt5基因的cDNA全長序列。序列比對結果顯示Dmrt1和Dmrt5均包含一個完整的開放閱讀框。氨基酸分析結果顯示，香魚 Dmrt1與虹鱒魚關系最近，氨基酸同源性達到81.5％；香魚 Dmrt5與斑馬魚Dmrt5相似度最高，為84%；系統(tǒng)進化樹顯示香魚Dmrt1和Dmrt5基因與其他魚類聚在一起，與人、鼠相聚較遠。熒光定量

3、PCR顯示：Dmrt1在成魚精巢中高表達，且在性腺分化后各時期都是精巢高表達，另外腸和脾臟中有微弱表達；仔魚期的第52-64天出現表達高峰；胚胎發(fā)育的原腸期表達達到最大值；Dmrt5基因在成魚中，在卵巢特異性表達，且在性腺分化后各時期都是卵巢特異性表達；幼苗時期在卵巢分化時期表達很明顯；Dmrt5基因在整個胚胎發(fā)育過程中均可檢測到表達且呈現遞增趨勢，在前仔魚期達到最大值。另外，Dmrt5基因在胚胎時期和精卵時期的原位雜交試驗結果顯示：D