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1、目的:
糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病微血管病變,發(fā)展到一定階段,可出現(xiàn)新生血管,嚴(yán)重?fù)p害視功能,由于其機(jī)制尚不完全明了,因此目前仍無(wú)理想的藥物治療方法。新生血管生成依賴(lài)于血管內(nèi)皮細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)的相互作用,因此血管內(nèi)皮細(xì)胞已作為目前研究對(duì)抗血管生成治療的獨(dú)特靶細(xì)胞。本研究探討兩種中藥夏枯草(Spica Prunellae)和皂角刺(Spina Gleditsiae)對(duì)體外培養(yǎng)的
2、血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的抑制作用,并從增殖細(xì)胞核抗原蛋白(PCNA)方面研究其抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的作用機(jī)制,為尋求防治糖尿病視網(wǎng)膜新生血管的確切有效藥物提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:
采用人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)為材料,取生長(zhǎng)良好的細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn),利用100umol/L二氯化鈷(CoCl2)誘導(dǎo)HUVEC增殖,同時(shí)分別將10mg/ml、20mg/ml、40mg/ml的夏枯草水提液和20mg/ml、40mg/ml、
3、80mg/ml的皂角刺水提液作用于增殖狀態(tài)下的HINEC24h,進(jìn)行以下的研究:
1.通過(guò)MTT法及CCK-8法來(lái)檢測(cè)不同濃度夏枯草和皂角刺對(duì)HUVEC增殖的抑制程度。
2.采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)夏枯草和皂角刺對(duì)HUVEC增殖細(xì)胞核抗原蛋白表達(dá)的影響。
結(jié)果:
1.100umol/L CoCl2具有誘導(dǎo)HUVEC增殖的作用。
2.CoCl2誘導(dǎo)HUVEC增殖時(shí)其核內(nèi)PCN
4、A蛋白表達(dá)升高。
3.夏枯草、皂角刺可明顯抑制CoCl2誘導(dǎo)的HUVEC增殖,并且有劑量依賴(lài)關(guān)系。
4.夏枯草、皂角刺能夠顯著降低HUVEC核內(nèi)PCNA蛋白表達(dá),從而抑制細(xì)胞增殖,并具有劑量依賴(lài)關(guān)系。
結(jié)論:
1.CoCl2誘導(dǎo)HUVEC增殖的作用與上調(diào)細(xì)胞核內(nèi)PCNA蛋白表達(dá)密切相關(guān)。
2.夏枯草、皂角刺都具有抑制HUVEC增殖的作用。
3.夏枯草、皂
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