2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩51頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、背景和目的:
   目前臨床上在脂質(zhì)代謝紊亂方面的治療還主要集中在降低血漿低密度脂蛋白膽固醇(low-densitylipoproteincholesterol,LDL-C)水平方面。降低LDL-C水平減少罹患心血管疾病風(fēng)險的觀點已經(jīng)得到廣泛認同。然而臨床結(jié)果顯示經(jīng)過他汀類藥物標(biāo)準(zhǔn)治療后即使LDL-C達標(biāo),仍有10.9%的心血管剩留風(fēng)險。治療新靶點研究(TNT)顯示,經(jīng)過他汀類藥物強化治療后即使LDL-C水平降至1.99mmol

2、/L,明顯低于達標(biāo)水平,仍有8.7%的絕對冠狀動脈事件剩留風(fēng)險,提示即使經(jīng)過他汀類藥物強化治療,冠狀動脈事件剩留風(fēng)險仍較高。血脂異常相關(guān)的心血管剩留風(fēng)險與多種因素有關(guān),以低高密度脂蛋白(high-densitylipoproteincholesterol,HDL-C)為特征的血脂異常是經(jīng)過他汀類藥物治療降低LDL-C水平后最常見的其中一種。如何降低冠狀動脈事件剩留風(fēng)險,減少心血管事件發(fā)生率,也是目前研究的焦點之一。HDL-C水平與心血管

3、發(fā)生率呈負相關(guān),約有1/3的血脂異?;颊咄ㄟ^提高HDL-C水平而受益[1],有研究表明血漿HDL-C每升高0.03mmol/L(1.0mg/dl)就可以使罹忠心血管疾病的風(fēng)險下降2%-4%[2]。另外LDL-C/HDL-C比值也是一個與心血管事件密切相關(guān)而獨立于LDL-C和HDL-C的重要指標(biāo)[3-6]。因此治療動脈粥樣硬化除了在一定范圍內(nèi)降低LDL-C水平之外如何有效的提高HDL-C水平就成為了重要的研究方向。
   內(nèi)皮脂酶

4、(endotheliallipase,EL)是近年新發(fā)現(xiàn)的甘油三酯脂肪酶家族新成員,直接由血管內(nèi)皮細胞分泌,在局部發(fā)揮作用。主要具有磷脂酶活性,是代謝HDL-C的關(guān)鍵酶,如何能夠通過減低或抑制EL活性,從而減少HDL-C的降解,是治療動脈粥樣硬化的新發(fā)展思路。因此研究EL的轉(zhuǎn)錄表達調(diào)節(jié),如何有效的降低EL就顯得極為迫切。
   血管緊張素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)和炎癥因子白細胞介素-6(interleukin-6

5、,IL-6)是兩種非常重要的致動脈粥樣硬化危險因素。AngⅡ能通過增加巨噬細胞清道夫受體CD36,促進巨噬細胞攝取氧化低密度脂蛋白(oxidizedlowdensitylipoprotein,ox-LDL),加速泡沫細胞形成;能通過誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)及細胞凋亡、產(chǎn)生氧自由基和影響纖溶功能等多方面參與動脈粥樣硬化的病理過程;可以增加斑塊不穩(wěn)定因子[7]EMMPRIN和MMPs[8、9]的表達,加重動脈粥樣硬化病變。IL-6也是一種重要的致動脈粥

6、樣硬化炎癥因子,它構(gòu)成了許多急慢性疾病的病理學(xué)基礎(chǔ),能夠損傷內(nèi)皮細胞造成內(nèi)皮細胞功能障礙,增加單核-內(nèi)皮細胞的粘附,還可以促進巨噬細胞對脂質(zhì)的攝取。核因子NF-κB是一種重要的核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,激活后可啟動包括細胞因子、化學(xué)因子等多種效應(yīng)基因的表達。絲裂原活化蛋白激酶MAPKs級聯(lián)反應(yīng)是細胞內(nèi)重要的信號傳導(dǎo)系統(tǒng)之一,參與多種胞內(nèi)信息傳遞過程,能對廣泛的細胞外刺激發(fā)生反應(yīng),研究表明,NF-κB和p38MAPK在動脈粥樣硬化中表達增加[10-

7、11],可能是各種危險因子誘發(fā)動脈粥樣硬化的機制之一,NF-κB和p38MAPK信號傳導(dǎo)途徑可能在EL的轉(zhuǎn)錄表達過程中發(fā)揮作用。本課題通過體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞,以IL-6和AngⅡ刺激內(nèi)皮細胞,觀察IL-6、AngⅡ、NF-κBp65阻斷劑PDTC(Pyrrolidinedithiocarbamicacid)和SB203580(p38MAPK抑制劑)對EL表達的影響,驗證IL-6和AngⅡ是否通過NF-κB和MAPK信號傳導(dǎo)途徑調(diào)節(jié)

8、EL的表達。
   研究方法:
   1.提取新生兒臍靜脈內(nèi)皮細胞進行原代培養(yǎng),經(jīng)鑒定為內(nèi)皮細胞后,貼壁法傳代培養(yǎng)。第四代細胞用于實驗。
   2.用于實驗的人臍靜脈內(nèi)皮細胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs)共分六組:①AngⅡ刺激組:在培養(yǎng)液中加入AngⅡ,使之終濃度為10umol/L;②四氫化吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)+AngⅡ刺激組,在培養(yǎng)液中加入

9、PDTC使之終濃度為10mmol/L,預(yù)處理1h后加入AngⅡ(10umol/L)刺激;③SB203580+AngⅡ(10umol/L)刺激組,在培養(yǎng)液中加入SB203580使之終濃度為10umol/L,預(yù)處理1h后加入AngⅡ(10umol/L)刺激;④IL-6刺激組:在培養(yǎng)液中加入rhIL-6,使之終濃度為10ng/mL,預(yù)處理1h后加入AngⅡ(10umol/L)刺激;⑤四氫化吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)+IL-6刺激組,在

10、培養(yǎng)液中加入PDTC,使之終濃度為10mmol/L,預(yù)處理1h后加入rhIL-6(10ng/ml)刺激;⑥SB203580(10umol/L)+IL-6刺激組,在培養(yǎng)液中加入SB203580使之終濃度為10umol/L,預(yù)處理1h后加入IL-6(10ng/mL)刺激。各組分別孵育0、2、4、8、12、24h后終止實驗,收集細胞。
   3.將收集的細胞提取蛋白,使用westernblot法檢測EL的表達。
   4.以上

11、數(shù)據(jù)使用統(tǒng)計學(xué)進行分析。
   結(jié)果:
   1.AngⅡ可以上調(diào)HUVECsEL的表達。HUVECs經(jīng)AngⅡ刺激后,在4,8,12h時其EL的表達量分別為0.362±0.041,0.738±0.034和0.387±0.051,均較0h(0.254±0.027)時明顯增加,均p<0.05。
   2.PDTC可以抑制由AngⅡ引起的EL表達的增高。HUVECs經(jīng)PDTC預(yù)處理1h后再加入AngⅡ刺激,其EL表達

12、量在作用4,8,12h時分別為0.287±0.037,0.433±0.041,0.303±0.025,與AngⅡ刺激組在相應(yīng)時間段內(nèi)EL的表達量相比明顯降低,均p<0.05。
   3.SB203580可以抑制由AngⅡ引起的EL表達的增高。HUVECs經(jīng)SB203580預(yù)處理1h后再加入AngⅡ刺激,其EL表達量在作用4,8,12h時分別為0.258±0.027,0.372±0.038,0.296±0.034,與AngⅡ刺激組

13、在相應(yīng)時間段內(nèi)EL的表達量相比明顯降低,均p<0.05。
   4.IL-6可以上調(diào)HUVECsEL的表達。HUVECs經(jīng)IL-6刺激后,在4,8,12h時其EL的表達量分別為0.293±0.062,0.633±0.052,0.462±0.065,均較0h(0.254±0.027)時明顯增加,均p<0.05。
   5.PDTC可以抑制由IL-6引起的EL表達的增高。HUVECs經(jīng)PDTC預(yù)處理1h后再加入AngⅡ刺激,

14、其EL表達量在作用4,8,12h時分別為0.208±0.056,0.582±0.036,0.428±0.066,與IL-6刺激組在相應(yīng)時間段內(nèi)的EL表達量相比明顯降低,均p<0.05。
   6.SB203580可以抑制由IL-6引起的EL表達的增高。HUVECs經(jīng)SB203580預(yù)處理1h后再加入AngⅡ刺激,其EL表達量在作用4,8,12,24h時分別為0.238±0.023,0.508±0.058,0.423±0.052,

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論