2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究ACE2基因轉(zhuǎn)染SD大鼠胸主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞后對AngⅡ誘導(dǎo)的血管緊張素Ⅱ1型受體(AT1R)、下游的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)蛋白磷酸化和細(xì)胞增殖的影響。
  方法:1.取SD大鼠胸主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)用組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞;2.細(xì)胞分組:正常細(xì)胞組、空載體組、AngⅡ組、AngⅡ+ACE2組、AngⅡ+厄貝沙坦組、AngⅡ+ACE2+厄貝沙坦組、ACE2組7個(gè)組;3.熒光實(shí)時(shí)定量PCR

2、檢測Lentiviral-ACE2、AngII及厄貝沙坦干預(yù)大鼠VSMC后ACE2mRNA、AT1受體mRNA的表達(dá);4.蛋白免疫印跡法檢測Lentiviral-ACE2、AngⅡ及厄貝沙坦干預(yù)大鼠VSMC后ACE2、AT1受體蛋白的表達(dá)及下游STAT3蛋白的磷酸化水平;5.利用CCK-8 Kit檢測Lentiviral-ACE2轉(zhuǎn)染后對AngⅡ誘導(dǎo)的VSMC細(xì)胞增殖的影響。
  結(jié)果:1.ACE2轉(zhuǎn)染SD大鼠胸主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)

3、胞呈感染復(fù)數(shù)依賴性增加ACE2 mRNA的表達(dá),以MOI=10的Lentiviral-ACE2轉(zhuǎn)染平滑肌細(xì)胞一定時(shí)間后ACE2 mRNA的表達(dá)量達(dá)峰值,與空白對照組及其它轉(zhuǎn)染濃度組間對比明顯增加(P<0.05);2.ACE2轉(zhuǎn)染SD大鼠VSMC后呈時(shí)間依賴性增加ACE2 mRNA的表達(dá)。以特定感染復(fù)數(shù)的Lentiviral-ACE2轉(zhuǎn)染96h后ACE2 mRNA的表達(dá)量達(dá)峰值,與空白對照組及其它轉(zhuǎn)染時(shí)間組間對比明顯增加(P<0.05);

4、3.AngⅡ呈濃度依賴性誘導(dǎo)平滑肌細(xì)胞AT1受體mRNA表達(dá)和STAT3蛋白磷酸化。10-7mol/LAngⅡ干預(yù)時(shí)AT1受體mRNA表達(dá)和STAT3蛋白磷酸化水平達(dá)峰值,與空白對照組及其它干預(yù)時(shí)間組間對比明顯增加(P<0.05);4.AngⅡ呈時(shí)間依賴性誘導(dǎo)平滑肌細(xì)胞AT1受體mRNA表達(dá)和STAT3蛋白磷酸化。AngⅡ干預(yù)8h時(shí)誘導(dǎo)平滑肌細(xì)胞AT1受體mRNA表達(dá)和STAT3蛋白磷酸化水平達(dá)峰值,與空白對照組及其它干預(yù)時(shí)間組間對比明

5、顯增加(P<0.05);5.熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測發(fā)現(xiàn)ACE2轉(zhuǎn)染SD大鼠VSMC后AngⅡ誘導(dǎo)的AT1R mRNA的表達(dá)水平與AngⅡ組相比明顯減少(P<0.05)。厄貝沙坦和ACE2共同干預(yù)SD大鼠VSMC后AngII誘導(dǎo)的AT1RmRNA的表達(dá)水平則與AngⅡ組相比顯著減少(P<0.01);6.Western-Blot檢測發(fā)現(xiàn)ACE2轉(zhuǎn)染SD大鼠VSMC后AngⅡ誘導(dǎo)的AT1R蛋白表達(dá)和STAT3蛋白磷酸化水平,與AngⅡ組相比明

6、顯減少(P<0.05)。ACE2和厄貝沙坦共同干預(yù)SD大鼠VSMC后AngⅡ誘導(dǎo)的AT1R蛋白表達(dá)和STAT3蛋白磷酸化水平,與AngⅡ組相比則顯著減少(P<0.01);7.CCK-8 Kit檢測發(fā)現(xiàn)AngⅡ+ACE2組的細(xì)胞增殖水平較AngⅡ組明顯降低(P<0.01)。
  結(jié)論:1.ACE2基因轉(zhuǎn)染平滑肌細(xì)胞后能抑制AngⅡ誘導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞AT1受體mRNA、蛋白表達(dá)及STAT3蛋白磷酸化水平。2.ACE2基因轉(zhuǎn)染可抑制Ang

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