禽源大腸桿菌質(zhì)粒介導氟喹諾酮類耐藥基因的檢測及中藥消除耐藥性研究.pdf

1、目前已報道的喹諾酮類耐藥機制有多種，其中由質(zhì)粒介導的耐藥機制合理地解釋了細菌耐藥性的高突變率及多種抗生素的耐藥相關(guān)性。質(zhì)粒上攜帶的耐藥基因只介導細菌對喹諾酮類藥物的低水平耐藥，但是能夠誘導靶位基因突變，引起高水平耐藥。因此，國內(nèi)外研究者一直在積極尋找能夠消除細菌耐藥性的方法。中藥因其天然環(huán)保、副作用小、應用安全等優(yōu)點，受到了研究者的青睞。
　　本研究采用PCR擴增技術(shù)對83株禽源大腸桿菌進行質(zhì)粒介導的喹諾酮類耐藥(PMQR)基因的

2、檢測，同時微量肉湯稀釋法測定恩諾沙星(ENR)的最小抑菌濃度。對其中6株大腸桿菌進行10味中藥的抑菌試驗，選取五味子、黃連、黃芩3味中藥對6株耐藥菌進行消除培養(yǎng)，篩選消除菌并通過抑菌試驗及PCR方法確定耐藥性及耐藥基因的消除情況，同時RT-qPCR分析消除前后耐藥基因表達量的變化。研究結(jié)果如下:
　　83株禽源大腸桿菌PMQR基因檢出率為86.7％（qnr、aac(6'）-Ib-cr、oqxAB分別為49.4％、83.1％、9.6

3、％，未檢出qnrC和qepA基因）。PMQR基因在禽源大腸桿菌中具有很高的流行率。抑菌試驗顯示有50株大腸桿菌對ENR耐藥，占全部菌株的比例為60％。說明本研究中禽源大腸桿菌對喹諾酮類藥物的耐藥情況嚴重。
　　10種中藥中山楂、五倍子、金銀花、黃柏、魚腥草的抑菌效果不明顯，艾葉和連翹抑菌效果相對較好，五味子、黃連、黃芩的抑菌效果最好。高、中、低劑量的五味子、黃連、黃芩提取液對6株大腸桿菌的耐藥性消除率在0-100％之間，高劑量組的