枸櫞酸噴托維林口腔崩解片人體生物等效性評價.pdf

1、枸櫞酸噴托維林口腔崩解片,是由重慶巨琪諾美制藥有限公司研制的改劑型新藥,屬化學(xué)藥品第5類。其臨床研究已獲SFDA批準(zhǔn),臨床批件號為2005L00212?？谇槐澜馄?ODT)是一種新型口服劑型,是近年來片劑研發(fā)的熱點(diǎn)。該劑型較傳統(tǒng)劑型具有服用方便、起效快、生物利用度高、口感好、適合老幼及行動不便者服用等優(yōu)點(diǎn)。因此,對已上市的療效肯定的藥物進(jìn)行劑型改造,制成口腔崩解片對于提高患者的服藥依從性,解決患者服藥難問題具有重要的意義。
　　

2、 目的:建立一種專屬性強(qiáng)、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確、適用于大批量生物樣品定量檢測的分析方法,測定人血漿中枸櫞酸噴托維林的濃度,用于重慶巨琪諾美制藥有限公司研制的枸櫞酸噴托維林口腔崩解片人體生物等效性研究,以評價其是否與劑量相同的市售參比制劑,天津力生制藥股份有限公司生產(chǎn)的枸櫞酸噴托維林糖衣片具有生物等效性,為臨床用藥提供依據(jù)。方法:采用開放、完全隨機(jī)、雙周期(兩期試驗(yàn)之間的清沈期為7天)、雙制劑等劑量(25mg)交叉口服給藥、自身對照單中心臨

3、床試驗(yàn)設(shè)計。將入選的20名男性健康志愿者按入選先后從小到大依次排序編號為1-20號,然后每位受試者用計算機(jī)產(chǎn)生一個隨機(jī)數(shù)字,按隨機(jī)數(shù)字大小分成A、B兩組,每組10人,其中一組受試者先服用受試制劑,后服用等劑量的參比制劑；另一組受試者先服用參比制劑,后服用等劑量的受試制劑。在給藥前及給藥后不同時間點(diǎn),抽取肘靜脈血4ml注入肝素試管中,于3000r/min 離心15min分離血漿,置-200C條件保存,待測。
　　 采用以鹽酸洛拉曲

4、克作為內(nèi)標(biāo)的HPLC-MS/ESI+法測定不同時間點(diǎn)枸櫞酸噴托維林的血藥濃度。色譜柱:Thermo Hypersil-HyPURITY C18(150×2.1mm,5 μ m):柱溫:25℃；流動相:0.1M乙酸銨溶液(甲酸調(diào)pH4.4)-甲醇(35:65)；流速:0.20mL/min；質(zhì)譜電離模式:電噴霧陽離子電離模式(ESI+)；毛細(xì)管電壓:3.0KV；錐孔電壓:30V；離了源溫度:108℃；脫溶劑溫度:350℃；錐孔反吹氣流量:5

5、0L/h；脫溶劑氣流量:350L/h；選擇離子監(jiān)測(SIR)定量分析準(zhǔn)分子離子峰[M+H]+:m/z334.1(噴托維林),m/z284.8(洛拉曲克)。
　　 數(shù)據(jù)處理:枸櫞酸噴托維林血藥濃度采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法由Masslynx 4.0質(zhì)譜工作站計算,并同法對隨行的質(zhì)控樣品濃度進(jìn)行計算,以考核測量數(shù)據(jù)的可靠性。藥代動力學(xué)參數(shù)的計算和統(tǒng)計學(xué)分析使用DAS2.1.1軟件完成。擬和血藥濃度.時間曲線,計算受試制劑(T)和參比制劑(R)的

6、主要藥代動力學(xué)參數(shù)F、Tmax、Cmax、AUC0→15和AUC0→∞,對藥代動力學(xué)參數(shù)Tmax、Cmax、AUC0→15和AUC0→∞經(jīng)自然對數(shù)轉(zhuǎn)換后以多因素方差分析(ANOVA)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn),然后用雙單側(cè)t檢驗(yàn)統(tǒng)計處理,計算AUC及Cmax的90％置信區(qū)間,評價兩制劑的生物等效件。等效標(biāo)準(zhǔn)為AUC和Cmax經(jīng)自然對數(shù)轉(zhuǎn)換后進(jìn)行方差分析與雙單側(cè)t檢驗(yàn),若受試制劑與參比制劑AUC0→15和AUC0→∞對數(shù)轉(zhuǎn)化形式之比值的90％置信區(qū)間

7、落在80％～125％范圍內(nèi),Cmax的對數(shù)轉(zhuǎn)化形式之比值的90％置信區(qū)間落在70％～143％范圍內(nèi),則認(rèn)為受試制劑與參比制劑生物學(xué)等效。Tmax用非參數(shù)法(配對Wilcoxon法)進(jìn)行統(tǒng)計處理,比較兩種制劑達(dá)峰時間的差異。結(jié)果:在確定的色譜質(zhì)譜條件下,枸櫞酸噴托維林血漿藥物濃度定量的線性范圍為0.78～300 ng·mL-1,定量下限為0.78 ng·mL-1。以噴托維林峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比(Y)對濃度(X)進(jìn)行回歸計算,回歸方程為:

8、Y=0.0421X-0.01744,r=0.998。噴托維林相對回收率在85％～115％范圍內(nèi),日內(nèi)、日間RSD均<15％。提取回收率結(jié)果表明,枸櫞酸噴托維林空白血漿標(biāo)準(zhǔn)樣品低、中、高濃度平均提取回收率均在70％～80％之間,內(nèi)標(biāo)平均提取回收率約為81％。穩(wěn)定性考察結(jié)果表明,枸櫞酸噴托維林血漿樣品在室溫放置12h,-20℃反復(fù)凍融4次,以及-200C放置23天,結(jié)果穩(wěn)定,RSD均小于15％。
　　 受試者口服受試制劑和參比制劑2

9、5 mg后,參比制劑與受試制劑的主要藥代動力學(xué)參數(shù)Tmax、Cmax、AUC0→15和AUC0→∞(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)分別為:2.525±1.208h和1.625±0.754 h；59.720±33.246 ng/mL和62.282±33.059 ng/mL；228.770±129.242 ng·h/mL和234.442±130.011 ng·h/mL；244.108±140.729 ng·h/mL和246.797±136.186 ng·h

10、/mL。受試制劑與參比制劑的相對生物利用度F(以AUC0→15為評價依據(jù))為(112.7±45.7)％。
　　 方差分析:受試制劑與參比制劑主要藥代動力學(xué)參數(shù)Cmax、AUC0→15和AUC0→∞經(jīng)自然對數(shù)轉(zhuǎn)換后采用方差分析,結(jié)果在個體順序間、制劑間和周期間,兩制劑InCmax、InAUC0→15、InAUC0→∞差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),兩周期不存在殘留效應(yīng)。
　　 雙單側(cè)t檢驗(yàn):兩制劑InCmax、InAUC

11、0→15、InAUC0→∞經(jīng)雙單側(cè)t檢驗(yàn),結(jié)果受試制劑沒有超過規(guī)定的參比制劑的高限和低限(P<0.05)。兩制劑InAUC0→15、InAUC0→∞比值的90％置信區(qū)間分別為86.0％～123.3％和86.5％～121.2％,均落在80％～125％范圍內(nèi):InCmax比值的90％置信區(qū)間為81.4％～138.4％,落在70％～143％等效區(qū)間內(nèi)。
　　 配對Wilcoxon法檢驗(yàn):兩制劑Tmax采用配對Wilcoxon法檢驗(yàn),結(jié)

12、果兩者Tmax差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),受試制劑的達(dá)峰時間顯著快于參比制劑。結(jié)論:用HPLC-MS/ESI+法測定人血漿中枸櫞酸噴托維林的濃度,方法專屬性強(qiáng)、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確,可用于枸櫞酸噴托維林口腔崩解片人體生物等效性研究。
　　 重慶巨琪諾美制藥有限公司研制的枸櫞酸噴托維林口腔崩解片(臨床試驗(yàn)批件號:2005L00212)與劑量相同的市售參比制劑,天津力生制藥股份有限公司生產(chǎn)的枸櫞酸噴托維林片(批號0711017)