骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜片層的體外構(gòu)建及成骨分化實驗研究.pdf

1、目的:對用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)細(xì)胞片層包裹成絲素蛋白(Silk fibroin,SF)/殼聚糖(chitosan,CS)/誘導(dǎo)后BMSCs的三維支架形成的復(fù)合體進(jìn)行觀察和檢測,并討論該復(fù)合體的成骨效果。
　　方法:密度梯度離心法分離培養(yǎng)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,向成骨細(xì)胞方向誘導(dǎo)分化后,接種至溫度反應(yīng)性培養(yǎng)皿中,37℃、5％飽和濕度培養(yǎng),然后降溫至20℃制備細(xì)胞片層。將制備好的BMSCs細(xì)胞片層與SF-CS/誘導(dǎo)后BMSCs生

2、物支架構(gòu)建成復(fù)合體。將實驗分為A、B組,A組為BMSCs細(xì)胞片層/SF-CS/誘導(dǎo)后BMSCs生物支架構(gòu)建成的復(fù)合體, B組為SF-CS/誘導(dǎo)后BMSCs生物支架,將2組放置于培養(yǎng)皿中,于37℃、5%飽和濕度體外培養(yǎng),于3、8、14天取材,進(jìn)行堿性磷酸酶活性定量、掃描電鏡等檢測。
　　結(jié)果:成功構(gòu)建了BMSCs細(xì)胞片層,BMSCs細(xì)胞片層/SF-CS/誘導(dǎo)后BMSCs生物支架復(fù)合體。堿性磷酸酶定量A組高于B組,ELLSA測定骨鈣素