重組人內(nèi)皮抑素協(xié)同順鉑抗鼻咽癌實驗及Ⅰ期臨床試驗研究.pdf

1、鼻咽癌是一種高發(fā)于華南、臺灣和新加坡等地區(qū)的常見的頭頸部惡性腫瘤之一。盡管放療能使早期鼻咽癌的5年生存率達到90﹪，然而即使結(jié)合化學(xué)治療進展期鼻咽癌患者5年生存率仍然低于50﹪。局部復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是鼻咽癌患者死亡的主要原因?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)腫瘤的生長與轉(zhuǎn)移有賴于新生血管為其提供生長轉(zhuǎn)移所必須的氧氣和營養(yǎng)，抗腫瘤新生血管治療已經(jīng)成為腫瘤研究的一種重要方法。抗腫瘤新生血管治療與傳統(tǒng)化學(xué)治療聯(lián)合能否提高的腫瘤治療的效果已經(jīng)成為腫瘤治療的研究熱點之一。

2、內(nèi)皮抑素(Endostatin)是迄今發(fā)現(xiàn)的活性最強的內(nèi)源性血管生長抑制因子之一，由于基因工程重組內(nèi)皮抑素蛋白體內(nèi)半衰期短及活性低等因素使其臨床應(yīng)用受到限制。我們構(gòu)建了腺病毒作載體攜帶人內(nèi)皮抑素基因(E10A)發(fā)現(xiàn)能明顯抑制人鼻咽癌裸鼠移植瘤的生長。本研究將抗腫瘤血管生成治療藥物E10A與傳統(tǒng)化療藥物DDP結(jié)合，探討這一聯(lián)合治療方案的抗鼻咽癌作用及機理。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與單藥及對照組比較E10A聯(lián)合DDP抑制人鼻咽癌CNE-2及C666-1模

3、型的生長更明顯。對腫瘤組織CD31免疫組化發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療組腫瘤組織血管明顯減少，TUNEL檢測發(fā)現(xiàn)聯(lián)合組腫瘤細胞凋亡細胞明顯增多。聯(lián)合治療不僅能在體外明顯抑制人血管內(nèi)皮細胞HUEVC的生長，且抑制HUEVC在Matrigel包被的平板上管腔的形成。聯(lián)合組在體內(nèi)也能對藻酸鹽包裹的腫瘤細胞亦有明顯得血管抑制作用?？傊瓻10A聯(lián)合DDP能明顯增強抗鼻咽癌的治療效果，能抑制腫瘤血管的生長，并促進腫瘤細胞的凋亡。這一研究還發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療并沒有增加化療

4、藥物的毒性。本研究在臨床中的傳統(tǒng)化療結(jié)合抗血管治療實際應(yīng)用提供了一定實驗基礎(chǔ)。 基因治療越來越多的證據(jù)顯示腫瘤的生長、浸潤及轉(zhuǎn)移都依賴于腫瘤新生血管的生長。內(nèi)皮抑素是迄今發(fā)現(xiàn)的作用最強大的內(nèi)源性的血管生長抑制因子。然而，重組人內(nèi)皮抑素蛋白由于其生物活性低、半衰期短等因素使其臨床應(yīng)用受到限制。本研究應(yīng)用腺病毒載體攜帶人內(nèi)皮抑素腺病毒注射液(E10A；從10<'10>病毒顆粒到10<'12>病毒顆粒)在15例晚期腫瘤患者進行了Ⅰ期臨

5、床試驗。研究發(fā)現(xiàn)瘤內(nèi)注射E10A未引起患者劑量限制性毒出現(xiàn)，最常見的E10A相關(guān)的不良事件是瞬時發(fā)熱和注射部位局部反應(yīng)。熒光定量PCR方法對載體的代謝分布研究顯示瘤內(nèi)注射E10A后，病毒可進入血液、咽喉及注射部位，在尿液和糞便中亦能檢測到少量病毒的存在。盡管大多數(shù)病人在治療后出現(xiàn)血清中抗腺病毒抗體的增高，但是ELISA檢測了14例病人血清中endostatin發(fā)現(xiàn)仍有13例患者血清中的endostatin在瘤內(nèi)注射E10A后逐漸升高。對