2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、研究背景及目的:
   鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)是我國南方、越南、菲律賓等其它南亞國家高發(fā)腫瘤之一,廣東、廣西、福建、湖南等省為國內(nèi)高發(fā)區(qū),部分地區(qū)高達(dá)30/10萬~50/10萬,調(diào)整死亡率分別為6.47/10萬、4.92/10萬、3.28/10萬、3.22/10萬,亦居世界首位(調(diào)整死亡率2.88/10萬)。男性發(fā)病率約為女性的2~3倍,40~50歲為高發(fā)年齡組。鼻咽癌的發(fā)病率和死亡率均

2、隨年齡增長而上升。鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)多因素作用、多基因參與、多階段病變發(fā)生的極其復(fù)雜的癌變過程,基因治療作為一種高效性、特異性、靶向性的治療手段已是醫(yī)學(xué)界廣泛關(guān)注的熱點(diǎn)。近年來研究發(fā)現(xiàn),抑瘤M(OncostatinM,OSM)基因?qū)δ[瘤細(xì)胞具有生長抑制作用和靶向誘導(dǎo)凋亡的功能。本項(xiàng)實(shí)驗(yàn)擬采用以腺病毒為載體的OSM基因,觀察其對(duì)該鼻咽癌細(xì)胞及裸鼠移植瘤的抑癌效應(yīng),并對(duì)其可能機(jī)理進(jìn)行了探討,為將來運(yùn)用Ad-OSM應(yīng)用于臨床提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

3、
   方法:
   體外:將Ad-OSM體外感染CNE-2Z鼻咽癌細(xì)胞,運(yùn)用RT-PCR及Westernblot檢測OSM基因在CNE-2Z細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄及表達(dá);MTT法和Annexin-V-PE/7-AAD雙染色的FCM檢測PBS、Ad-GFP、Ad-OSM體外抑制鼻咽癌細(xì)胞生長和誘導(dǎo)凋亡的抑癌增效效應(yīng);PI染色的FCM檢測Ad-OSM對(duì)鼻咽癌細(xì)胞周期的影響;運(yùn)用RT-PCR檢測P21、P27、Bcl-2、Surviv

4、in等以分析Ad-OSM誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡可能的分子機(jī)制;Westernblot檢測Ad-OSM對(duì)CNE-2Z細(xì)胞中cleavedCaspase-3的表達(dá)的影響。體內(nèi):用CNE-2Z細(xì)胞構(gòu)建裸鼠移植瘤,在鼻咽癌的裸鼠移植瘤動(dòng)物模型上,運(yùn)用免疫組化方法檢測CNE-2Z鼻咽癌移植瘤生長相關(guān)因子的表達(dá):(1)P21、P53、Bax、Caspase-3、等促凋亡因子;(2)Bcl-2、Cox-2等凋亡抑制因子。
   結(jié)果:
  

5、 RT-PCR和Westernblot檢測證實(shí)腺病毒介導(dǎo)的OSM基因可以在CNE-2Z細(xì)胞中穩(wěn)定轉(zhuǎn)錄及表達(dá);Ad-OSM體外能明顯抑制CNE-2Z鼻咽癌癌細(xì)胞的生長,引起G1期阻滯和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡(P<0.05)。體內(nèi)也能明顯抑制CNE-2Z裸鼠鼻咽癌移植瘤的生長。分子機(jī)制檢測結(jié)果表明:Ad-OSM能明顯上調(diào)CNE-2Z鼻咽癌細(xì)胞P21、P27、P53、Bax、Caspase-3和下調(diào)Cox-2、Bcl-2、Survivin等細(xì)胞周期和凋

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