基于基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控模式的MAGE家族分類及其與生物學功能吻合度的初步探討.pdf

1、本實驗應用全反式維甲酸(ATRA)誘導雌激素受體陽性的乳腺癌MCF-7細胞，RT-PCR檢測MAGE家族分子的表達，研究MAGE家族分子在全反式維甲酸誘導分化作用中表達情況。結果發(fā)現(xiàn)分化相關亞家族(MAGE家族堿性蛋白)隨分化誘導而表達增強，相反，腫瘤相關亞家族(MAGE家族酸性蛋白)隨分化誘導而表達降低。同時，利用FCM發(fā)現(xiàn)在濃度為10-6mol/L的ATRA作用下，乳腺癌MCF-7細胞出現(xiàn)G1期阻滯；利用MTT法發(fā)現(xiàn)濃度為10-6m

2、ol/L的ATRA對于MCF-7細胞具有顯著的抑制作用；利用Giemsa染色檢測ATRA對于MCF-7細胞的凋亡作用。以上實驗初步證明了MAGE基因家族的轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控模式的預測結果的可信性，為完善MAGE家族分化相關亞家族和腫瘤相關亞家族分類和蛋白酸堿分類的假說提供了有價值的信息，為下一步研究MAGE家族蛋白與細胞增殖、分化、凋亡的關系，建立它們之間的網(wǎng)絡聯(lián)系奠定了基礎。同時，也在從轉(zhuǎn)錄模式上對基因家族進行再分類研究基因功能做出了嘗試。

3、本實驗也為研究ATRA與乳腺癌治療的關系，為臨床上使用ATRA治療實體瘤奠定了一定基礎。 此外，對restin調(diào)節(jié)細胞周期的機制進行了初步的研究。由于restin的高表達伴隨細胞G1期的阻滯，而CyclinD1是調(diào)節(jié)細胞周期由G1期向S期轉(zhuǎn)變的重要分子。于是，利用RT-PCR同時檢測了維甲酸誘導MCF-7細胞分化過程中不同時期restin和CyclinD1的表達情況。結果restin表達是從無到有，逐漸增強，CyclinD1的表