擬南介轉錄因子NF-YA10生物學功能的初步研究.pdf

1、NF-Y是一類結合CCAAT-box的重要轉錄因子，包括三個亞基，NF-YA、NF-YB和NF-YC。在擬南芥中已鑒定了10個NF-YA，13個NF-YB和13個NF-YC基因。NF-Y家族在植物的生長發(fā)育及逆境反應中發(fā)揮了重要調控作用并受到miR169家族成員的調控.我們對擬南芥轉錄因子NF-YA10生物學功能進行了初步研究。主要研究內容和結果如下:
　　1、構建AtNF-YA10過表達載體并轉化擬南芥，獲得過表達AtNF-YA

2、10轉基因擬南芥純系，并對其表型進行研究鑒定。主要包括抗逆表型、開花表型及葉片發(fā)育表型。結果發(fā)現(xiàn)過表達株系在抗逆表型和開花表型上與野生型無明顯差異，過表達株系有比野生型更大的蓮座，說明過表達AtNF-YA10促進了擬南芥葉子的發(fā)育。
　　2、對過表達AtNF-YA10轉基因擬南芥純系進行生長素相關表達譜芯片分析。找出了5個與生長素相關的AtNF-YA10可能的靶基因。
　　3、利用雌激素誘導的轉錄激活系統(tǒng)構建雌激素誘導的轉錄

3、激活系統(tǒng)調控的AtNF-YA10∶3×flag融合基因植物表達載體并轉化擬南芥，獲得轉基因純系，并對其表達外源AtNF-YA10∶3×flag蛋白的條件進行了優(yōu)化。選定1/2MS培養(yǎng)基生長10天的雌激素誘導16h為最優(yōu)的表達條件。
　　4、以雌激素誘導的轉錄激活系統(tǒng)調控的AtNF-YA10∶3×flag融合基因轉基因純系為材料對NF-YA10進行CHIP實驗，分析通過表達譜芯片找出的生長素相關的基因是否為AtNF-YA10真正的靶