新型趨化因子MIP-2γ的生物學(xué)功能研究.pdf

1、第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文新型趨化因子MIP2γ的生物學(xué)功能研究姓名：項(xiàng)鶯松申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：曹雪濤2001.5.1BiologicalFunctionsofaNovelc蘭堅(jiān)hemokineMIP2Y第一部分新型趨化因子MIP2y的免疫和造血調(diào)節(jié)作用來(lái)源于樹(shù)突狀細(xì)胞的趨化因子M1P2y，可能在細(xì)胞免疫、體液免疫及造血凋控中發(fā)揮了廣泛的作用。1趨化作用。采用Boyde／l小室和無(wú)內(nèi)皮細(xì)胞的Transwell法，分析了

2、MIP27對(duì)不同類(lèi)型自細(xì)胞在不同成熟和活化階段的趨化作用，結(jié)果表明MIP一27只能趨化未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞(由CD34造血干／祖細(xì)胞來(lái)源的，培養(yǎng)第7天的CD34DC‰)，對(duì)成熟樹(shù)突狀細(xì)胞(培養(yǎng)第11天的CD34一DC—d11及LPS刺激后的CD34一DCd11)趨化作用很弱甚至沒(méi)有；對(duì)PHA活化的T細(xì)胞有趨化作用，經(jīng)FACS分析表明對(duì)CD4和CD8T細(xì)胞沒(méi)有明顯的偏向性，但對(duì)新鮮分離的T和B細(xì)胞沒(méi)有趨化作用；更為特殊的是還能趨化CD34“造

3、血于／祖細(xì)胞，在MIP2y為100rig／mE時(shí)，對(duì)CD34細(xì)胞的趨化指數(shù)是CD34‘細(xì)胞的6倍多。2活化T細(xì)胞作用。(ELISA檢測(cè)表明，MIP一柳除能趨化T細(xì)胞外，還能顯著促進(jìn)亞適劑量(25ug／mL)PHA誘導(dǎo)的T細(xì)胞增殖和活化，并向Thl型細(xì)胞因子偏移(分泌Ⅲ一2和IFN7)，但不促進(jìn)Th2型細(xì)胞因子IL4和IL—lO分泌。同時(shí)3H。TdR摻入法表明脾臟混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)增強(qiáng)，反應(yīng)指數(shù)SI的升高與MIP27成劑量依賴(lài)性。3自身反饋

4、性抑制樹(shù)突狀細(xì)胞作用。通過(guò)FACS分析和3H—TdR摻入法分析，發(fā)現(xiàn)MIP2vN抑制樹(shù)突狀細(xì)胞抗原提呈功能，表現(xiàn)為表面MHCII類(lèi)分子IAb和共刺激分子B7，CD40表達(dá)下降，DC—T混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)下降。ELISA檢測(cè)培養(yǎng)上清細(xì)胞因子表明，MIP27減弱體外CpG刺激的樹(shù)突狀細(xì)胞分泌IL一12功能。Griess’法檢測(cè)結(jié)果卻顯示增加了NO的生成。體內(nèi)給予MIP27后，小鼠表現(xiàn)為脾臟樹(shù)突狀細(xì)胞數(shù)量和功能的下降，但T細(xì)胞數(shù)量增加，混合淋巴