中國荷斯坦奶牛乳鐵蛋白基因多態(tài)性與乳腺炎相關性的研究.pdf

1、本研究選取中國荷斯坦奶牛群體共計250頭個體為研究對象，采用PCR-RFLP技術對試驗牛群中存在的乳鐵蛋白基因的四個多態(tài)位點進行了PCR擴增、酶切檢測和測序分析，發(fā)現該牛群的乳鐵蛋白基因四個多態(tài)位點均存在三種基因型；結合試驗牛群的DHI測定所得到的育種資料記錄和生產性能指標（主要選擇體細胞評分、產奶量、乳脂率和乳蛋白率），運用最小二乘線性模型，對這幾個位點的多態(tài)性與奶牛乳腺炎之間的相關性進行了分析，發(fā)現乳鐵蛋白基因-916位點的T/G突

2、變和-927位點的G/A突變所產生的不同基因型與生產性狀之間的效應檢驗不顯著，而+72位點的T/C突變和-478位點的G的插入所產生的不同基因型之間的生產性能指標出現差異，并找到了具有乳腺炎抗性的基因型和優(yōu)良的等位基因，為進一步的標記輔助選擇提供了有力的依據，并為奶牛乳腺炎的抗病育種工作提供了理論依據。研究結果如下： 根據NCBI上已登錄的乳鐵蛋白基因序列并參考Seyfert所報道的多態(tài)位點，確定所研究的四個突變位點并對乳鐵蛋白

3、基因進行了PCR擴增和測序分析。研究發(fā)現：本試驗奶牛群體在這四個位點上均存在突變，分別是-927位點的G到A的突變，-916位點的T到G的突變，-478位點的G的插入和+72位點的T到C的突變，預期結果與報道的一致。 利用改造的酶切位點對-927位點、-916位點和+72位點的PCR擴增產物分別進行TaqⅠ、HaeⅢ和Eco T14Ⅰ酶切，利用已存在的酶切位點對-478位點進行HpyF10VⅠ酶切，通過聚丙烯酰胺凝膠電泳對酶切產

4、物檢測分析，發(fā)現在這四個突變位點上均存在有三種基因型：AA基因型、AB基因型和BB基因型。 結合DHI測定所記錄的該試驗奶牛群的生產性能數據，利用統(tǒng)計分析軟件SAS將乳鐵蛋白基因四個位點上的突變所產生不同基因型對體細胞評分、產奶量、乳脂率和乳蛋白率的效應進行最小二乘均值顯著性檢驗。結果發(fā)現：+72位點（T/C）的AB基因型個體的SCS值極顯著低于BB基因型個體（P<0.01），顯著低于AA基因型個體（P<0.05），BB基因型個

5、體與AA基因型個體差異不顯著（P>0.05）；同時，AB基因型個體的產奶量值顯著高于AA基因型、BB基因型個體（P<0.05），表明本試驗奶牛群中AB基因型個體表現出乳腺炎抗性；-478位點（/G） AA基因型個體的SCS值極顯著低于AB基因型、BB基因型個體（P<0.01），同時AA基因型個體的產奶量值顯著高于AB基因型、BB基因型個體，表明本試驗奶牛群中AA基因型個體表現出了乳腺炎抗性；另外，-478位點（/G） AB基因型個體的乳