單純環(huán)境因素誘導的小鼠干眼模型.pdf

1、目的：創(chuàng)建智能環(huán)境控制系統(tǒng)(IntelligentControlledEnvironmentalSystem，ICES)，有效調(diào)控環(huán)境濕度(RelativeHumidity，RH)、溫度(Temperature，T)和氣體流量(Airflow,AF)，并應(yīng)用ICES創(chuàng)建一個單純環(huán)境因素誘導的小鼠干眼模型。 方法：創(chuàng)建智能環(huán)境控制系統(tǒng)，應(yīng)用一種新型分子吸濕劑(分子篩)，通過兩階梯除濕法降低實驗環(huán)境的相對濕度(RH)，并利用空調(diào)控制

2、環(huán)境溫度(T)、內(nèi)置可調(diào)速風扇控制風速(WV)，從而有效控制濕度、濕度和氣體流量。將30只4-6周齡的雌性Balb/c小鼠飼養(yǎng)于ICES中，在特定實驗環(huán)境下(RH15±3％,AF=2.1±0.2m/s，T:21-23℃)淆導模型，同時在正常環(huán)境(RH:60％-80％,noAF,T:21-23℃)中設(shè)置對照組。應(yīng)用酚紅棉線試驗、角膜熒光素染色、組織病理切片、掃描電鏡和免疫熒光等方法，于第3、7、14、28和42天分期觀測淚液分泌量，角膜屏

3、障功能，眼表上皮形態(tài)以及凋亡標志物表達的改變。應(yīng)用免疫熒光法，于第42天，檢測跟表上皮細胞凋亡標志物(activecaspase-3)表達的改變。 結(jié)果：智能環(huán)境控制系統(tǒng)可快速負反饋調(diào)控環(huán)境濕度至實驗需求水平，可使溫度、濕度和氣體流量同時得到有效調(diào)控。實驗組與對照韁小鼠在基點處各觀測指標差異無統(tǒng)計學意義。實驗組小鼠在ICES巾飼養(yǎng)3天和7天后，淚液分泌量較對照組無明顯減少(P＞0.05)，而在14、28和42天淚液分泌量明顯減少

4、，各時間點均有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。實驗組小鼠在ICES中飼養(yǎng)3天和7天后，角膜熒光素染色程度較對照組無明顯差異(P＞0.05)，在14、28和42天角膜熒光素染色程度明顯加重，各時間點均有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。實驗組小鼠在ICES中飼養(yǎng)3大和7天后，角膜上皮形態(tài)無明顯改變，在14、28和42天角膜上皮明顯變薄且上皮細胞排列紊亂。打描電鏡檢查顯示對照組小鼠角膜上皮細胞表面微皺襞和微絨毛分布均勻，細胞間呈緊密連接。在14、28

5、和42天實驗組小鼠角膜上皮表明脫落細胞增加，微皺襞和微絨毛大量丟失，表層細胞間連接呈縫隙改變，而在第3和第7天，無明顯改變。和對照組小鼠相比，在14、28和42天實驗組小鼠結(jié)膜上皮鱗狀化生，杯：狀細胞密度下降，上皮細胞層次增加且排列異常紊亂。存第42天，限表(結(jié)膜、角膜)上皮出現(xiàn)凋亡標志物(activecaspase-3)高表達。 結(jié)論：低濕、高氣體流量的壞境會導致正常小鼠淚液分泌量減少，并出現(xiàn)與臨床干眼的相似的眼表上皮病變以及