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文檔簡介
1、細胞的增殖調(diào)控是生命體賴以生存和發(fā)展的基礎,對細胞的增殖調(diào)控機制進行研究能夠為腫瘤的治療提供新的藥物靶點,并能為藥物的研發(fā)奠定理論基礎。本論文就兩個對細胞增殖起調(diào)控作用的蛋白KIAA0157和Hepassocin調(diào)節(jié)細胞增殖的機制進行研究。
KIAA0157是一種功能不明的新基因。我們前期的研究發(fā)現(xiàn)KIAA0157在多種腫瘤組織中下調(diào)表達,過表達可抑制多種細胞的克隆形成能力。本論文研究發(fā)現(xiàn):過表達KIAA0157能增強p5
2、3的穩(wěn)定性和p53活性,RNAi下調(diào)細胞內(nèi)KIAA0157表達加速p53降解,抑制p53活性;KIAA0157以p53依賴的方式抑制細胞集落形成并誘導細胞發(fā)生G0期阻滯。KIAA0157可與MDM2發(fā)生相互作用,并抑制MDM2介導的p53泛素化和降解。這些研究結果表明KIAA0157可能通過MDM2調(diào)節(jié)p53穩(wěn)定性及其活性,并在腫瘤細胞增殖調(diào)控方面發(fā)揮作用,為今后的癌癥治療提供了新的靶點。
Hepassocin(HPS),
3、是一種肝臟特異表達蛋白質(zhì),在肝損傷修復、肝源細胞增殖調(diào)控中發(fā)揮重要作用。前期研究表明HPS可特異性刺激正常肝細胞增殖,但過表達抑制肝腫瘤細胞增殖,其分子機制不明。我們的研究發(fā)現(xiàn):1)采用免疫印跡和ELISA方法證明正常肝細胞系L02細胞能夠產(chǎn)生并分泌HPS;2)HPS蛋白質(zhì)的細胞外分泌依賴于N端22個氨基酸。3)利用FITC標記的HPS證實L02細胞膜上存在HPS特異受體;4)HPS中和抗體可中和L02細胞條件培養(yǎng)液的增殖刺激活性并抑制
4、L02細胞增殖。這些研究表明HPS可通過自分泌循環(huán)調(diào)節(jié)L02細胞增殖,阻斷這個循環(huán)可抑制L02細胞的增殖。為研究HPS對肝癌細胞生長的影響,我們在HepG2肝癌細胞中過表達野生型HPS和N端22個氨基酸缺失HPS(非分泌型HPS),結果發(fā)現(xiàn)兩種HPS均可抑制HepG2細胞的克隆形成能力,并導致細胞發(fā)生G0/G1期阻滯,但非分泌型HPS的抑制作用要顯著強于野生型HPS。此外,雖然HepG2肝癌細胞也產(chǎn)生和分泌HPS,但外源HPS對肝癌細胞
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