銅針留置前后海綿狀靜脈畸形病理學(xué)及血管內(nèi)皮細(xì)胞P27kip1變化和調(diào)亡情況.pdf

1、目的:通過(guò)觀察銅針留置前后海綿狀靜脈畸形的形態(tài)及病理學(xué)變化情況，經(jīng)免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)了解第Ⅷ因子相關(guān)抗原和P27kip1的表達(dá)差異和經(jīng)TUNEL法測(cè)定血管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡情況，進(jìn)一步探討銅針留置治療海綿狀靜脈畸形可能的機(jī)制。
　　 方法:
　　 ①選擇2009年9月至2012年1月中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院整形美容外科就診的海綿狀靜脈畸形患者6例（共留取對(duì)照性標(biāo)本12例）?；颊弑救思捌浜戏ūO(jiān)護(hù)人均對(duì)治療方案知情同意。
　　

2、②采用工業(yè)用銅線，制備成一端尖，另一端圓形的銅針，用細(xì)砂紙反復(fù)擦凈表面氧化膜層，使純銅外露。高壓蒸汽滅菌備用。所有患者均在麻醉下行病變局部銅針留置治療，留置銅針12～56枚，平均30枚，留置時(shí)間均為1周。
　　 ③標(biāo)本經(jīng)蘇木精-伊紅染色，然后在Nikon Eclipse80i顯微鏡下觀察銅針留置前后畸形組織病理變化。采用免疫組織化學(xué)技術(shù)，利用第Ⅷ因子相關(guān)抗原定位于血管內(nèi)皮細(xì)胞，并觀測(cè)銅針留置前后海綿狀靜脈畸形血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞核中

3、P27kip1的表達(dá)差異，同時(shí)計(jì)算圖像陽(yáng)性面積率。采用脫氧核糖核酸末端轉(zhuǎn)移介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法（TUNEL法）檢測(cè)銅針留置前后畸形組織內(nèi)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡情況，并計(jì)算凋亡指數(shù)(AI)。采用Nikon DS高分辨率數(shù)碼相機(jī)經(jīng)MS-Elements AR3.0軟件拍照。采用Ver3.00程序軟件做圖像數(shù)字采集和通過(guò)SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件完成統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果:6例患者（共留取銅針留置前后標(biāo)本12例）均進(jìn)入結(jié)果分析。
　

4、　 ①肉眼可見(jiàn)銅針留置治療后的海綿狀靜脈畸形病損范圍較治療前縮小。
　　 ②組織病理學(xué)變化:治療前海綿狀靜脈畸形的部分血管呈囊狀不規(guī)則擴(kuò)張，其管腔大小不一、管壁厚薄不均;銅針留置后血管結(jié)構(gòu)大部分萎縮或消失，殘留大量淡染的結(jié)構(gòu)不清晰的結(jié)締組織填充，可見(jiàn)大量浸潤(rùn)的炎性細(xì)胞。
　　 ③第Ⅷ因子相關(guān)抗原在海綿狀靜脈畸形組織血管內(nèi)皮細(xì)胞胞漿內(nèi)均彌散分布呈棕黃色顆粒。
　　 ④銅針留置后血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞核中P27kip1水

5、平明顯高于留置前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 ⑤銅針留置前后海綿狀靜脈畸形血管內(nèi)皮細(xì)胞均有不同程度的凋亡。銅針留置后凋亡水平較銅針留置前上調(diào)不顯著，其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 ①銅針留置后病變體積及病損面積均縮小，其組織內(nèi)血管的管腔縮小或閉鎖，血管內(nèi)皮細(xì)胞及血管結(jié)構(gòu)萎縮或消失，血管周圍纖維結(jié)締組織明顯增多。
　　 ②銅針留置后血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞核中P27kip1的