己酮可可堿對(duì)實(shí)驗(yàn)性非酒精性脂肪性肝炎的療效及其作用機(jī)制的研究.pdf

1、背景和目的：非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholicfattyliverdiseaesNAFLD)的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，其中促炎細(xì)胞因子在造成肝細(xì)胞損傷的“第二次打擊”中起著非常重要的作用。TNF-a是介導(dǎo)肝損傷的主要促炎因子，誘發(fā)炎癥反應(yīng)、肝壞死，可直接或間接地對(duì)肝細(xì)胞造成損害，并參與非酒精性脂肪性肝炎(Non-alcoholicsteatohepatitis，NASH)肝纖維化的發(fā)生與發(fā)展。己酮可可堿(pentoxifylline,

2、PTX)是一種非選擇性磷酸二酯酶抑制劑。研究顯示，PTX可抑制腫瘤壞死因子α(TNF-α)mRNA的表達(dá)，從而減少TNF-α產(chǎn)生。本實(shí)驗(yàn)以NASH大鼠為模型，進(jìn)一步觀(guān)察PTX對(duì)NASH的療效，并應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法研究肝組織TNF-α的表達(dá)情況，以探索PTX的作用機(jī)制。 材料與方法：雄性SD大鼠40只，隨機(jī)分為3組，分別進(jìn)行以下處理：(1)正常對(duì)照組10只：喂養(yǎng)普通飼料至16周。(2)模型組20只：喂養(yǎng)高脂飼料，12周后隨機(jī)處死

3、10只，病理均證實(shí)為非酒精性脂肪性肝炎。另外10只繼續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料至16周。(3)治療組10只：喂養(yǎng)高脂飼料至12周，在制備模型后用己酮可可堿(16mgkg-1.d-1)灌胃4周。實(shí)驗(yàn)16周后處死所有剩余大鼠。取肝組織，迅速置于Bowin液中固定，做常規(guī)石蠟切片，蘇木精和伊紅(HaematoxylinandEasin，HE)染色，進(jìn)行光鏡觀(guān)察，炎癥活動(dòng)度計(jì)分。檢測(cè)體重(Bodyweight)、肝指數(shù)(Liverindex)、血清谷丙轉(zhuǎn)氨

4、酶(AlanineAminotransferase，ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartateAminotransferase，AST)、甘油三酯(triglyceridesTG)、膽固醇(cholesterolTC)、空腹血糖(fastingbloodglyceamiaFBG)、胰島素(insulineINS)及透明質(zhì)酸酶(hyaluronicHA)水平。應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法進(jìn)行TNF-α染色，采用計(jì)算機(jī)圖像系統(tǒng)，分析和觀(guān)察TNF-α

5、在肝組織中表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)采用SPSS11.0軟件進(jìn)行分析，P＜0.05為差異有顯著性意義。 結(jié)果：1、模型組大鼠體重、肝指數(shù)明顯高于正常對(duì)照組(P＜0.01)，PTX治療組體重、肝指數(shù)均顯著降低(P＜0.05)；2、模型組大鼠血清ALT、AST明顯增高，與正常對(duì)照組比較有非常顯著性差異(P＜0.01)，治療組血清AST顯著下降，與模型組相比較有非常顯著性差異(P＜0.01)；而血清ALT兩組比較無(wú)差異。3、模型組血

6、清TC、FBG明顯升高，與正常對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.05)，治療組血清TC、FBG明顯下降，與模型組比較差異有顯著性意義(P＜0.05)。4、治療組血清HA水平與對(duì)照組比較明顯下降(P＜0.05)。5、組織學(xué)觀(guān)察顯示治療組肝組織炎癥壞死程度明顯減輕，炎癥活動(dòng)度計(jì)分明顯下降(P＜0.01)。6、TNF-α在肝臟中的陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率模型組較對(duì)照組明顯升高(P＜0.01)，治療組陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率顯著下降(P＜0.01)。 結(jié)論：