燒傷膿毒癥大鼠血清誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞中Nrf2的表達(dá).pdf

1、目的：將內(nèi)毒素及細(xì)菌感染燒傷大鼠后，制備出不同組別的血清，研究由各組血清誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞中Nrf2的表達(dá)。本文的主要目標(biāo)是研究當(dāng)某些細(xì)菌或內(nèi)毒素及燒傷等因素?fù)p害巨噬細(xì)胞后，Nrf2如何表達(dá)。 方法：此項(xiàng)研究中，實(shí)驗(yàn)分為兩組進(jìn)行：(1)動(dòng)物模型；(2)細(xì)胞模型。在動(dòng)物模型中，將Wistar大鼠作為實(shí)驗(yàn)鼠分：1.標(biāo)準(zhǔn)組；2.LPS組；3.單純燒傷組；4.銅綠假單胞菌組；5.金黃色葡萄球菌組。將除對(duì)照組外的其余四組均放置于90度開(kāi)水中18

2、秒制備成40％面積的深二度燒傷創(chuàng)面。在以上四組中，分別將金黃色葡萄球菌0.8ml(濃度為8×109cuf/ml)、綠膿桿菌0.5ml(含菌量為1×108cuf/ml)，注入大鼠腹腔，將6mgkg-1LPS靜脈注射到大鼠體內(nèi)。8小時(shí)后通過(guò)心臟穿刺收集血液并經(jīng)過(guò)離心制成血清。細(xì)胞模型實(shí)驗(yàn)中，巨噬細(xì)胞264.7作為靶細(xì)胞，取上述血清干擾后，通過(guò)RT-PCR和WESTERN BLOT技術(shù)，研究Nrf2在靶細(xì)胞和上清中的表達(dá)。 結(jié)果：所有

3、的5組血清干擾細(xì)胞中，在RT-PCR和Western Blot兩種實(shí)驗(yàn)中的Nrf2均有顯著表達(dá)。在RT-PCR結(jié)果中Nrf2 mRNA表達(dá)水平較高體現(xiàn)在單純燒傷組(81.190±3.833)，其次分別為L(zhǎng)PS組(71.883±2.243)、綠膿桿菌組(65.708±2.975)、金葡球菌組(60.525±3.512)，而正常對(duì)照組Nrf2 mRNA表達(dá)相對(duì)較低(40.985±3.0921)；在Western-Blot實(shí)驗(yàn)中，Nrf2蛋白