NF-E2相關(guān)因子在燒傷膿毒癥大鼠免疫臟器中的表達(dá).pdf

1、NF-E2相關(guān)因子在燒傷膿毒癥大鼠免疫臟器中的表達(dá)目的探討Nrf2在燒傷膿毒癥大鼠各免疫臟器中的表達(dá)規(guī)律，初步分析Nrf2在膿毒癥發(fā)生發(fā)展中的可能作用機(jī)制。 方法：將wistar大鼠分為正常對(duì)照組、單純燙傷組、燙傷復(fù)合金葡菌膿毒癥組和燙傷復(fù)合綠膿桿菌膿毒癥組。除正常對(duì)照組外單純燙傷組、燙傷復(fù)合金葡菌膿毒癥組和燙傷復(fù)合綠膿桿菌膿毒癥組，依不同時(shí)相(2小時(shí)、8小時(shí)、24小時(shí))，分為三個(gè)亞組，并于相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)，斷頸處死大鼠，開(kāi)腹，無(wú)菌操

2、作下分別切取脾臟、肺臟和肝臟：一部分液氮凍存，用RT-PCR檢測(cè)Nrf2 mRNA表達(dá)情況，用Western-Blot檢測(cè)Nrf2的蛋白質(zhì)表達(dá)情況；另外一部分10％中性甲醛固定，石蠟包埋、切片、行HE染色，然后在光鏡下觀(guān)察組織學(xué)改變。 結(jié)果： 1.正常大鼠脾、肺、肝組織中均含有少量的Nrf2，在研究的臟器中以肺、脾組織含量豐富，其次為肝臟。 2.在觀(guān)察單純燒傷組大鼠中各組織Nrf2 mRNA表達(dá)均有明顯下調(diào)，但是

3、在脾組織中其表達(dá)在8小時(shí)下調(diào)至最低值。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)在24小時(shí)，表達(dá)又上調(diào)并接近正常對(duì)照組的表達(dá)值。 3.金黃色葡萄球菌所致?tīng)C傷膿毒癥大鼠脾、肺、肝組織中Nrf2 mRNA表達(dá)中只有在肝組織中表達(dá)有上調(diào)，在肺組織和脾組織中的表達(dá)均為下調(diào)；且在肝組織中2-8小時(shí)呈上調(diào)趨勢(shì)，并于2小時(shí)上調(diào)至峰值，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)在24小時(shí)又呈下調(diào)趨勢(shì)。而肺和脾組織則呈下調(diào)趨勢(shì)。Western Blot結(jié)果顯示，在24小時(shí)，脾、肝、肺組織中Nrf2蛋白

4、表達(dá)均呈下調(diào)趨勢(shì)。 4.綠膿桿菌所致?tīng)C傷膿毒癥動(dòng)物脾、肺、肝組織中Nrf2 mRNA表達(dá)僅在肝組織2小時(shí)表達(dá)有上調(diào)，而在其余實(shí)驗(yàn)觀(guān)察的病變組織及時(shí)相中表達(dá)都呈下調(diào)趨勢(shì)。 結(jié)論： 1、正常大鼠脾、肺、肝組織中均含有少量的Nrf2，在研究的臟器中以脾、肺組織含量豐富，其次為肝臟。說(shuō)明Nrf2的分布主要集中在相應(yīng)的免疫器官中。 2、單純燒傷直接導(dǎo)致Nrf2表達(dá)下調(diào)，其后逐漸增加，提示Nrf2直接參與了燒傷后免疫