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文檔簡介
1、目的:探討PTEN在膿毒癥內(nèi)皮細(xì)胞中的表達(dá)
方法:80只健康SD雄性大鼠(250g±29g),隨機(jī)分為4組(每組20只),盲腸結(jié)扎穿孔三組(25%、50%、75%)和對(duì)照組,通過比較盲腸結(jié)扎的不同比例觀察膿毒癥大鼠的生存率;盲腸結(jié)扎50%穿孔組作為膿毒癥造模組,在膿毒癥造模48小時(shí)后取血液和肺組織樣本,檢測膿毒癥大鼠血液中LPS、IL-1β、IL-6以及TNF-α的濃度。用血漿作用于體外培養(yǎng)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,并應(yīng)用免疫組化
2、方法檢測PTEN的表達(dá)狀況;用Westen-blot的方法檢測臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中PTEN蛋白的表達(dá),并用RT-PCR的方法檢測PTEN的tuRNA的水平。
結(jié)果:通過觀察我們發(fā)現(xiàn)隨著盲腸結(jié)扎比例的提高,膿毒癥大鼠的死亡率也在增加,最后我們采用50%結(jié)扎比例的盲腸作為CLP的標(biāo)準(zhǔn)模型。經(jīng)檢測LPS:對(duì)照組為0.19±0.1(pg/ml),膿毒癥組為3.39±1.26(pg/ml);IL-6:對(duì)照組為20.35±8.11(pg/
3、ml),膿毒癥組為314.81.92±48.7(pg/ml);IL-1β:對(duì)照組為18.73±4.76(pg/ml),膿毒癥組為125.9±17.98(pg/ml);TNF-α:對(duì)照組為12.54±5.76(pg/ml),膿毒癥組為105.59±18.97(pg/ml)。各種指標(biāo)在膿毒癥組均明顯上升,與對(duì)照組相比較均有顯著性差異(p<0.05)。免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)在CLP組臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中PTEN的表達(dá)明顯增高;Westen-blot的方
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