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1、目的:觀察綠膿桿菌所導(dǎo)致的燒傷創(chuàng)面膿毒癥急性肺損傷(ALI)大鼠肺組織的細(xì)胞凋亡及肺損傷情況。 方法:以SPF級(jí)SD大鼠為試驗(yàn)動(dòng)物,完全隨機(jī)地分為兩組,試驗(yàn)組采用燙傷后痂下注射綠膿桿菌復(fù)制創(chuàng)面膿毒癥模型,對(duì)照組燙傷后痂下注射生理鹽水作為對(duì)照。分別于燙傷后創(chuàng)面痂下注射細(xì)菌或生理鹽水Oh、2 h、12 h、24 h和48 h以1%的戊巴比妥鈉25mg/kg腹腔注射麻醉后處死大鼠。切取痂組織,進(jìn)行組織細(xì)菌定量檢測(cè)。取出肺組織,行肺組織
2、HE染色,觀察病理變化,肺組織損傷評(píng)分。TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡,計(jì)量凋亡指數(shù)(AI),分析細(xì)菌含量與凋亡指數(shù)之間的關(guān)系。 結(jié)果:試驗(yàn)組創(chuàng)面組織細(xì)菌定量明顯超過同時(shí)間對(duì)照組細(xì)菌含量,隨時(shí)間變化逐漸增多,且于2h即達(dá)到105CFU/g。肺組織病理檢查顯示肺組織HE染色可見肺泡間隔增寬,間質(zhì)充血水腫,肺泡腔變窄,炎癥細(xì)胞滲出,小氣道損傷等病理改變,試驗(yàn)組損傷改變明顯重于同時(shí)間對(duì)照組,且隨時(shí)間變化,損傷逐漸加重。肺組織損傷評(píng)分以量化的
3、形式反映肺組織損傷變化,通過肺損傷評(píng)分反映試驗(yàn)組損傷改變明顯重于同時(shí)間對(duì)照組,且證實(shí)兩組之間的改變存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。TUNEL法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)肺組織內(nèi)細(xì)胞發(fā)生凋亡,細(xì)胞包括支氣管上皮細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞以及炎癥細(xì)胞。試驗(yàn)組AI明顯高于同時(shí)間對(duì)照組AI,且在24hAI最高,隨著時(shí)間延長AI呈現(xiàn)先增長后下降趨勢(shì)。組織細(xì)菌量與AI相關(guān)性分析顯示,組織細(xì)菌量在Oh-24h與AI呈正線性相關(guān)。 結(jié)論:綠膿桿菌導(dǎo)致膿毒癥時(shí)肺組織內(nèi)大量細(xì)
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