大鼠血管外膜炎癥對內(nèi)皮功能的影響及通心絡(luò)的干預(yù)研究.pdf

1、目的： 長期以來一直強調(diào)動脈內(nèi)皮功能障礙/損傷是動脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)的始動因素并影響病變?nèi)^程。而血管外膜炎癥對動脈粥樣硬化形成的影響未予重視。最近的研究證實，血管外膜炎癥在某些個體可成為AS啟動的始發(fā)門戶，血管外膜的炎癥細胞浸潤與AS病變程度相關(guān)。但關(guān)于血管外膜炎癥在AS發(fā)生中對內(nèi)膜和內(nèi)皮功能損傷的影響及作用機制尚不清楚。傳統(tǒng)通絡(luò)方藥通心絡(luò)超微粉劑能否抑制血管外膜炎癥引起的血管內(nèi)皮功能障礙國內(nèi)外

2、研究較少。為此本實驗采用套管法建立大鼠頸動脈外膜炎癥模型，并給予通心絡(luò)超微粉劑(TXL)干預(yù)治療，觀察血管外膜炎癥對血清一氧化氮(nitric oxide，NO)、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)及血漿內(nèi)皮素(endothelin，ET)水平的影響。以探討血管外膜炎癥在動脈硬化形成中的作用機制及通心絡(luò)超微粉劑的保護作用。 材料與方法 1、動物模型制備和實驗分組取30只12周齡的健康雄性W

3、istarKyoto大鼠，體重200～250克(購買于吉林大學(xué)動物實驗室)，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機分為3組，每組10只。 空白組：不予任何處理和干預(yù)。 外膜炎癥組：，行硅膠管包裹術(shù)，常規(guī)麻醉后，消毒頸部正中皮膚，解剖分離出右側(cè)頸總動脈，右側(cè)頸總動脈包裹硅膠管一周構(gòu)建模型。 通心絡(luò)(TXL)治療組：通心絡(luò)超微粉劑(800mg/kg·d)每日一次灌胃。TXL藥物應(yīng)用一周，行硅膠管包裹大鼠右側(cè)頸動脈手術(shù)，術(shù)后繼續(xù)TXL

4、藥物應(yīng)用一周，行第二次手術(shù)留取標本進行指標檢測。 2、病理形態(tài)學(xué)檢測術(shù)后取右側(cè)頸總動脈包裹血管段及空白組右側(cè)頸總動脈相應(yīng)血管段，常規(guī)病理蠟塊制作，切片，行HE染色，光鏡觀察動脈外膜炎癥浸潤程度及中膜、內(nèi)膜病變和管腔狹窄情況.并應(yīng)用計算機圖像分析測量內(nèi)膜厚度、中膜厚度和管腔面積。 3、內(nèi)皮分泌功能指標的檢測術(shù)后一周處死每組動物，處死前心內(nèi)采血5ml，分別采用硝酸還原酶法檢測血清NO水平，酶聯(lián)免疫法檢測血清NOS水平和血漿E

5、T濃度等反映內(nèi)皮分泌功能的指標。 4、統(tǒng)計學(xué)分析所有數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件包進行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標準差(x-±s)表示，組間比較采用方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗。P<0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 實驗結(jié)果 1、光鏡下大鼠頸動脈病理形態(tài)學(xué)改變光鏡下可見： 1、空白組：大鼠右側(cè)頸總動脈外膜無炎癥細胞浸潤，中膜無增厚、內(nèi)膜完整無增生、管腔無狹窄。外膜炎癥組；包裹段血管外膜增厚，有大量炎

6、癥細胞浸潤主要為巨噬細胞，大量新生滋養(yǎng)血管；中膜增厚，平滑肌細胞細胞排列及細胞數(shù)未見明顯變化，內(nèi)彈力板彎曲，炎性細胞浸潤；內(nèi)膜完整，但有炎性細胞浸潤，無新生血管生成。TXL治療組可見外膜有少量炎癥細胞浸潤，輕度增厚，無新生滋養(yǎng)血管、中膜輕度增厚無彈力板彎曲、內(nèi)膜無增生、管腔無明顯變窄。 2、內(nèi)膜厚度、中膜厚度和管腔面積測定：與空白組比較，外膜炎癥組大鼠右側(cè)頸總動脈中膜厚度明顯增加，管腔面積明顯縮小(P<0.01)，但內(nèi)膜厚度增加

7、不明顯。TXL組大鼠右側(cè)頸總動脈中膜厚度較外膜炎癥組增厚較少，管腔面積縮小較少。 2、血清NO、NOS及血漿ET檢測結(jié)果與空白組比較(58.91±1.42μmol/L)，外膜炎癥組血清NO含量明顯減少，(38.52±1.85μmol/L)，P<0.05，血清NOS含量增高(7.92±0.13μmol/L)，差異具有明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，血漿ET濃度也增高(135.93±3.67pg/L)，P<0.05。與外膜炎癥組比較

8、，TXL組血清NO和NOS含量均增高(50.61±1.87μmol/L，10.23±0.33μmol/L)，P<0.05，血漿ET濃度降低(109.14±3.04pg/L)，P<0.05，但較空白組增高(55.31±3.12pg/L)。 結(jié)論： 1、大鼠頸總動脈外膜炎癥持續(xù)七天即可導(dǎo)致外膜、中膜動脈粥樣硬化樣的病理改變。 2、在內(nèi)膜形態(tài)學(xué)改變尚不明顯前即可檢測到內(nèi)皮功能的損傷。 3、通心絡(luò)可減輕血管外膜炎