慢性乙肝肝膽濕熱證的蛋白質(zhì)組學(xué)研究及清肝利濕湯干預(yù).pdf

1、目的： 1.觀察清肝利濕湯（QGLS）干預(yù)慢性乙型肝炎（CHB）患者前后PBMC的差異蛋白質(zhì)表達(dá)，探討QGLS治療CHB的作用及機(jī)制。 2.通過建立正常人及CHB患者外周血單核細(xì)胞（PBMC）蛋白質(zhì)的雙向凝膠電泳圖譜，并分析其差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，尋找與CHB疾病相關(guān)蛋白，探討CHB的致病機(jī)制。 方法： 1.將肝膽濕熱型慢性乙肝患者40例隨機(jī)分為2組，分別予中藥清肝利濕湯和西藥拉米夫定治療，用藥3個月后觀察臨

2、床療效。 2.利用雙向凝膠電泳技術(shù)（2-DE）分離來源20例正常人及20例CHB肝膽濕熱型患者用清肝利濕湯治療前后的外周靜脈血單個核細(xì)胞（PBMC），用基質(zhì)輔助激光解吸飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOF-MS）對用清肝利濕湯治療前后的差異蛋白質(zhì)進(jìn)行測定肽質(zhì)量指紋譜，檢索MSDB和Swiss-Prot蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫鑒定差異蛋白。 結(jié)果： 1.臨床觀察：中藥清肝利濕湯治療肝膽濕熱型慢性乙肝其臨床療效和西藥拉米夫定無顯著差

3、異，在證候改善方面優(yōu)于西藥組。 2.各組PBMC總蛋白2-DE圖譜的建立及差異蛋白質(zhì)識別：分別獲得正常人、CHB患者治療前、后PBMC總蛋白2-DE圖譜。健康對照組的蛋白質(zhì)點(diǎn)總數(shù)為980±28個，肝膽濕熱證組960±21個，清肝利濕湯組997±15個，經(jīng)過背景消減后，分別將健康對照組作為參考膠進(jìn)行3塊膠間的蛋白質(zhì)點(diǎn)的匹配，結(jié)果得到健康對照組的平均匹配點(diǎn)數(shù)為816±65個，肝膽濕熱證組844±87，清肝利濕湯組817±55，其平均

4、匹配率分別為85％，88％，82％。 3.差異蛋白質(zhì)點(diǎn)質(zhì)譜鑒定及蛋白功能分類：發(fā)現(xiàn)并鑒定了正常人、CHB患者治療前、治療后BPMC中的差異表達(dá)大于2倍的蛋白質(zhì)點(diǎn)19個。分別為細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)與細(xì)胞生長相關(guān)蛋白（如熱休克蛋白70），凝血相關(guān)蛋白（如β-血小板球蛋白前體，血小板堿性蛋白前體），參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的相關(guān)蛋白（如肌動蛋白的細(xì)胞骨架，Transgelin-2）及假定蛋白等。 結(jié)論： 1.清肝利濕湯改善了慢性乙肝肝膽