家蠅抗真菌肽MAF-1碳端功能結(jié)構(gòu)域128～153肽段(MAF-1A)對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞體外免疫功能的影響.pdf

1、目的：了解不同濃度的MAF-1A作用于小鼠腹腔巨噬細(xì)胞不同時(shí)間后引發(fā)其吞噬功能的變化及其相關(guān)細(xì)胞因子NO、IL-6、IL-10、TNF-α含量的變化，從而為家蠅抗真菌肽MAF-1早日開(kāi)發(fā)成為新型藥物得以應(yīng)用于臨床提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：1.采用中性紅法對(duì)經(jīng) MAF-1A體外作用后的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能進(jìn)行測(cè)定2.采用硝酸還原酶法對(duì)經(jīng)不同濃度MAF-1A，不同體外作用時(shí)間后的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞 NO分泌水平的檢測(cè)3.經(jīng)酶聯(lián)免疫吸

2、附實(shí)驗(yàn)對(duì)經(jīng)不同濃度MAF-1A，不同體外作用時(shí)間后的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞TNF-α、IL-6、IL-10分泌量進(jìn)行檢測(cè)4.采用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR的方法對(duì)經(jīng)不同濃度MAF-1A，不同體外作用時(shí)間后的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞 TNF-α基因表達(dá)量的檢測(cè)。
　　結(jié)果：1.100ug/ml、50ug/ml、25ug/mlMAF-1A作用24h后的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬中性紅的能力上升，其吞噬率與對(duì)照組相比 P<0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.100ug

3、/ml、50ug/ml、25ug/mlMAF-1A作用于小鼠腹腔巨噬細(xì)胞6h、12h后其相關(guān)細(xì)胞因子NO的含量升高，與對(duì)照組相比P<0.05。相同濃度組作用小鼠腹腔巨噬細(xì)胞24h后，100ug/ml、50ug/ml濃度組 MAF-1A能引起NO含量的升高，與對(duì)照組相比P<0.05。3.100 u g/m l MAF-1A作用于小鼠腹腔巨噬細(xì)胞6h后其相關(guān)細(xì)胞因子TNF-α分泌量增加，與對(duì)照組相比P<0.05；各濃度組MAF-1A作用于小

4、鼠腹腔巨噬細(xì)胞12h后其相關(guān)細(xì)胞因子 TNF-α分泌量增加，與對(duì)照組相比P<0.05。100ug/ml、50ug/mlMAF-1A作用于小鼠腹腔巨噬細(xì)胞24h后其相關(guān)細(xì)胞因子 TNF-α分泌量增加，與對(duì)照組相比 P<0.05。4.100 u g/m l、50 u g/m l、25 u g/m l MAF-1A作用于小鼠腹腔巨噬細(xì)胞6h、12h、24h后其相關(guān)細(xì)胞因子 IL-6、IL-10分泌量對(duì)照組相比無(wú)明顯變化，P>0.05。5.10

5、0 u g/m l MAF-1A作用于小鼠腹腔巨噬細(xì)胞6h后，其分泌的細(xì)胞因子TNF-α基因表達(dá)量上調(diào)，P<0.05。其余條件下，TNF-α的基因表達(dá)量與陰性對(duì)照組相比無(wú)明顯變化，P>0.05。
　　結(jié)論：1.經(jīng)100ug/ml、50ug/ml、25ug/mlMAF-1A作用24h后的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬中性紅的能力上升，吞噬率增高，即MAF-1A可活化小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。2.不同濃度 MAF-1A作用小鼠腹腔巨噬細(xì)胞