小白菊內(nèi)酯及聯(lián)合阿霉素與地塞米松對Jurkat細(xì)胞增殖及凋亡影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:體外研究不同濃度的小白菊內(nèi)酯(PTL)對急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞Jurkat細(xì)胞增殖抑制及凋亡、以及PTL有無增強(qiáng)阿霉素(ADR)和地塞米松(DEX)抗Jurkat的白血病效應(yīng)及可能機(jī)制，為小白菊內(nèi)酯抗白血病的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:采用人淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系Jurkat細(xì)胞為研究對象，計(jì)算PTL（40、20、15、10、5、2.5、1μmol/L）的24h、48h、72h的半數(shù)抑制濃度(IC50)，以及DEX（10

2、、20、50、100、250、500、1000μmol/L）、ADR（0.25、0.5、0、75、1、2、4、8μmol/L）的48h的IC50;采用MTT法檢測48小時PTL分別與DEX、ADR聯(lián)合應(yīng)用對Jurkat細(xì)胞增殖抑制的影響;采用流式細(xì)胞術(shù)檢測PTL分別與DEX、ADR聯(lián)合應(yīng)用48小時后Jurkat細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)變化及凋亡率;應(yīng)用免疫組化法檢測PTL、PTL分別與DEX、ADR聯(lián)合應(yīng)用作用48h后Jurkat細(xì)胞NF-κBp

3、65蛋白表達(dá)的變化。
　　結(jié)果:5-20μmol/LPTL可以明顯抑制細(xì)胞增殖，對細(xì)胞增殖的抑制作用隨PTL濃度增加和作用時間延長而逐漸增強(qiáng)(r=0.837，P＜0.01)，PTL的24，48，72h的IC50分別為4.71±1.32、8.11±1.96、11.4±1.54umol/L(F=87.56,P均＜0.01)。ADR、DEX呈濃度依賴性地抑制Jurkat細(xì)胞增殖(r=0.956，r=0.853，P＜0.01)，48h的I

4、C50分別為0.53、324.35μmol/L。0、5、10umol/LPTL處理48h，Jurkat細(xì)胞的凋亡率分別為4.2±1.23％、10.5±2.03％、22.1±2.28％，(F=68.32，p＜0.01)。0、5、10umol/LPTL作用于Jurkat細(xì)胞48h后的NF-κBp65的表達(dá)率和陽性積分均存在統(tǒng)計(jì)差異(F=78.25，p＜0.01)。2、4、8、16μmol/LPTL聯(lián)合500μmol/LDEX、0.25μmo

5、l/LADR時較單用等劑量的DEX、ADR處理Jurkat細(xì)胞48h后的抑制率明顯增高(F=123.86，p＜0.05)。單用DEX、ADR、PTL及PTL聯(lián)合DEX及ADR作用Jurkat細(xì)胞48h的凋亡率分別為（64.13±4.62）％、（68.18±4.11）％、（25.18±3.07）％、（77.05±4.35）％、（81.68±4.56）％，實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞凋亡率高于對照組（5.25±1.4）％(F=107.32，p＜0.01)，

6、PTL聯(lián)合DEX及ADR組的凋亡率明顯高于單用DEX及ADR組(F=116.25，p＜0.01)。單藥PTL、DEX及PTL聯(lián)合ADR、DEX作用Jurkat細(xì)胞48h后的NF-κBp65的陽性積分明顯低于對照組(F=106.55，p＜0.01)，而ADR單藥組則明顯高于對照(F=73.28，p=0.00)，PTL聯(lián)合組均明顯低于單用組(F=56.52，p＜0.01)。
　　結(jié)論:PTL有抑制Jurkat細(xì)胞增殖及促進(jìn)凋亡的作用，