小白菊內酯對人小細胞肺癌NCI-H446細胞增殖及凋亡作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  研究小白菊內酯(parthenolide, PTL)抑制人小細胞肺癌NCI-H446細胞增殖及誘導細胞凋亡的作用,并探究其中可能存在的分子作用機制。
  方法:
  實驗分為對照組與藥物處理組(1.5μg/ml組、2.0μg/ml組、2.5μg/ml組和3.0μg/ml組)。采用MTT比色法檢測經不同濃度組PTL處理48h后NCI-H446細胞的增殖水平;Hochest33258熒光染料使細胞核著色,倒置熒

2、光顯微鏡下觀察凋亡細胞核形態(tài)學變化;流式細胞儀分析細胞凋亡率變化情況; qRT-PCR分別檢測不同濃度組 PTL處理48h后NCI-H446細胞中 NF-κB、Caspase-3、8、9基因的表達水平;以及Wsetern Blot檢測NF-κB、Caspase-3、8、9蛋白的表達水平。
  結果:
  1.MTT檢測結果顯示:PTL抑制小細胞肺癌 NCI-H446細胞增殖并呈濃度依賴性。
  2.Hochest332

3、58染色結果顯示,PTL作用NCI-H446細胞48h后,細胞數量減少,細胞核固縮碎裂,形成凋亡小體,細胞發(fā)生凋亡。
  3.流式細胞儀檢測顯示, PTL處理 NCI-H446細胞后,細胞發(fā)生凋亡,且凋亡水平與藥物濃度梯度呈正相關,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
  4.RT-PCR及 Wsetern Blot結果顯示,與對照組比較,PTL下調NCI-H446細胞中NF-κB基因及蛋白表達,同時能夠上調Caspase-3

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