小白菊內(nèi)酯對人骨肉瘤細胞株MG-63增殖的抑制作用.pdf

1、背景與目的:小白菊內(nèi)酯是從芳香類植物中提取的一種倍半萜內(nèi)酯化合物,是艾菊的主要活性成分。作為一種己經(jīng)有數(shù)百年歷史的傳統(tǒng)藥物,小白菊內(nèi)酯過去主要用于治療偏頭痛、風濕病及炎癥。近年來研究發(fā)現(xiàn),小白菊內(nèi)酯具有較強的抗腫瘤活性,在體外可抑制多種腫瘤細胞株的生長增殖,并誘導其凋亡,比如肺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌和多發(fā)性骨髓瘤。此外,小白菊內(nèi)酯還可以增強腫瘤細胞對其他多種抗腫瘤藥物的敏感性。但是至今還沒有對于骨肉瘤細胞作用的相關(guān)報道,本研究的目的是探討小

2、白菊內(nèi)酯對人骨肉瘤細胞株MG-63的增殖抑制作用。
　　 方法:本實驗所用的人骨肉瘤細胞株MG-63在含有10％的小牛血清的DMEM培養(yǎng)液,于37℃,5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。取對數(shù)生長期的細胞用于實驗,給予不同濃度的小白菊內(nèi)酯后,于不同時間點,通過倒置顯微鏡觀察骨肉瘤細胞的形態(tài),同時用四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測MG-63細胞的增殖能力的變化,應(yīng)用公式計算出不同濃度的小白菊內(nèi)酯對MG-63細胞的抑制率。為了進一步獲得一個明確的

3、量化的對于MG-63細胞凋亡的影響,用Annexin V和PI雙染色方法檢測細胞的凋亡百分率。實驗數(shù)據(jù)用(均數(shù)士標準差)表示,應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理,均數(shù)間進行獨立樣本t檢驗,P＜0.05被認為有顯著差異。
　　 結(jié)果:細胞形態(tài)學觀察:倒置顯微鏡下,對照組細胞呈梭形,細胞核呈圓形,致密,處在一個良好的生長狀態(tài)。而治療組細胞形態(tài)不規(guī)則,邊緣粗糙,有不同程度的萎縮。MTT結(jié)果表明;不同濃度的小白菊內(nèi)酯對MG-63細胞的體外

4、生長具有不同程度的抑制作用;隨著濃度的加大及作用時間的延長,其抑制作用逐步增強,說明小白菊內(nèi)酯對MG-63細胞生長的抑制作用,呈濃度和時間依賴性。流式細胞儀結(jié)果表明:隨著小白菊內(nèi)酯濃度的升高,(4080120μmol)凋亡細胞明顯增多,早期凋亡率分別為(4.15％,7.56％,11.23％),晚期凋亡率和壞死率分別為(1.87％,3.06％,4.33％)早期凋亡和晚期凋亡都有變化,而早期凋亡變化幅度較大。
　　 結(jié)論:本實驗以人