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文檔簡介
1、目的:WIF-1是Wnt信號通路中最常見抑制因子之一,本實驗研究WIF-1對人骨肉瘤MG-63細胞Wnt信號通路中β-catenin表達量的影響。
方法:細胞培養(yǎng)人骨肉瘤MG-63細胞,0ng/ml濃度的WIF-1作為空白對照組,分別以0ng/ml、48 ng/ml、60 ng/ml、80 ng/ml、120 ng/ml濃度的WIF-1刺激MG-63細胞,分別用FQ-PCR及Western-Blot法從基因水平、蛋白水平測定細
2、胞β-catenin的表達量;細胞培養(yǎng)人骨肉瘤MG-63細胞,用WIF-1刺激細胞,分別在第0、12、24、48、72、96h對各組細胞進行計數(shù),觀察空白組及WIF-1刺激組細胞數(shù)目的變化情況。
結(jié)果:不同濃度(0ng/ml、48 ng/ml、60 ng/ml、80 ng/ml、120 ng/ml)WIF-1刺激下,F(xiàn)Q-PCR法顯示β-catenin mRNA的相對表達總量2-⊿⊿CT分別為1、0.55±0.30、0.44±
3、0.24、0.35±0.15、0.24±0.21。與空白組相比較,WIF-1刺激下β-cateninmRNA表達量均降低(F=6.02,P<0.05)。隨著WIF-1濃度的增加,β-catenin mRNA表達量下降,但組間的抑制作用無明顯差別(P>0.05); Western-Blot法顯示β-catenin/β-actin蛋白相對表達量分別為1.4±0.11、0.86±0.10、0.51±0.11、0.45±0.06、0.18±0.
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