基于網絡藥理學的芪參益氣方抗心肌缺血整合作用研究.pdf

1、中藥復方藥效物質及其作用機制的研究是中藥現(xiàn)代化的關鍵科學問題之一。秉承中醫(yī)整體論的治病理念，中藥復方與復雜性疾病之間的相互作用是“系統(tǒng)-系統(tǒng)”的非線性、復雜作用模式，因而采用傳統(tǒng)方法難以滿足揭示這種復雜網絡狀關聯(lián)關系。近年興起的網絡藥理學和系統(tǒng)生物學試圖從宏觀或整體調控的角度詮釋藥物對生物網絡的作用，為中藥復方作用機制研究提供了新的研究思路和技術手段。在臨床上芪參益氣方用于治療缺血性心臟病，其有效性已得到循證醫(yī)學的研究證實，但芪參益氣方

2、抗心肌缺血的整合作用還缺乏系統(tǒng)性研究，阻礙了芪參益氣方被國際市場認可和接受的進程。鑒于此，本論文運用網絡藥理學方法和技術，開展芪參益氣方抗心肌缺血作用研究，通過整合分子、細胞及動物水平的多層次研究，初步詮釋其多成分組合、多靶點、多途徑的整合協(xié)同作用模式。
　　主要研究內容如下:
　　1、構建了冠心病網絡藥理學研究平臺CHD@ZJU V2.0，并開展相關網絡分析。通過整合文獻、疾病相關公開數據庫及蛋白-蛋白相互作用關系等資源，

3、構建冠心病疾病網絡，并采用網絡拓撲學、子簇聚類及生物功能GO等開展網絡分析，結果顯示與疾病發(fā)病機制相關的生物學途徑主要有:免疫炎癥反應、血管生成、缺氧和氧化應激反應、能量代謝等;
　　2、研究了芪參益氣方主要代表性成分對疾病網絡的調控作用。采用文本知識挖掘技術得到芪參益氣方主要成分的作用靶點信息，構建藥物-疾病網絡，研究通過網絡分析發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rg1(Rg1)和丹參素(DSS)的共同作用靶點是JUN、MAPK8和MAPK3，黃芪甲

4、苷(Ast)的心血管藥理作用與免疫炎癥反應、細胞遷移、粘附及血液循環(huán)等相關;
　　3、研究了主要活性成分Ast、DSS、Rg1和反式橙花叔醇(ENL)單給及其組合給藥抗大鼠急性心肌梗死(AMI)的藥效作用，發(fā)現(xiàn)Ast和DSS能顯著減小心肌梗死范圍，組合給藥能更顯著地減小梗死范圍。進一步的轉錄組學分析結果表明，免疫炎癥、血管生成、心室重構和心肌修復、能量代謝等可能是四個成分發(fā)揮多靶點、多途徑整合協(xié)同作用對抗AMI的關鍵生物學途徑;<

5、br>　　4、采用H9C2心肌細胞缺氧、氧化應激損傷模型，研究四個主要成分對心肌細胞的協(xié)同保護作用。Ast，DSS和Rg1能對抗H9C2缺氧損傷及氧化應激損傷，四個成分的低濃度組合給藥能協(xié)同增強抗心肌細胞缺氧損傷作用;
　　5、采用LPS誘導RAW264.7炎癥反應模型，研究四個主要成分的協(xié)同抗炎作用。研究發(fā)現(xiàn)倍半萜烯類成分ENL、SDL和RDL對LPS誘導NO分泌具有不同程度的抑制作用。DSS和Rg1兩成分組合能協(xié)同增強對抗LP