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1、中藥復(fù)方化學(xué)物質(zhì)組成復(fù)雜、干擾成分眾多,藥理作用具有多層次、多靶點(diǎn)的特點(diǎn)。人體疾病是多種致病因素聯(lián)合而導(dǎo)致的機(jī)體失衡,恰與中藥復(fù)方系統(tǒng)觀的治療原則相適應(yīng)。網(wǎng)絡(luò)藥理多成分多靶點(diǎn)的核心理論可以將中藥復(fù)方與疾病有機(jī)的結(jié)合起來(lái)。
本研究基于液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),采用多質(zhì)譜信息組合策略分析中藥復(fù)方成分,即以飛行時(shí)間質(zhì)譜得到復(fù)方成分精確質(zhì)量數(shù)為依據(jù),結(jié)合離子阱得到多級(jí)分子碎片對(duì)化合物進(jìn)行鑒定解析。由于中藥成分在不同掃描模式的響應(yīng)程度存在
2、差異,是以進(jìn)行正、負(fù)兩離子模式進(jìn)行采集,使獲得的化合物信息互補(bǔ)。
UCG復(fù)方解析鑒定得到83種特征小分子化合物主要為蒽醌類、生物堿類、黃酮類、三萜皂苷類、有機(jī)酸類物質(zhì)。通過(guò)Chembiodraw Ultra12.0軟件繪制復(fù)方各成分并轉(zhuǎn)化三維立體結(jié)構(gòu),利用PharmMapper數(shù)據(jù)庫(kù)反向藥效團(tuán)匹配方法預(yù)測(cè)得到復(fù)方作用靶點(diǎn)230個(gè),并與慢性腎衰疾病基因相互關(guān)聯(lián)得到AKR1B1、GSTA1、CDK2、VDR、ESR1等個(gè)重點(diǎn)基因;
3、與治療慢性腎衰化學(xué)藥共有靶標(biāo)相互關(guān)聯(lián)得到VDR、CA2、ACE、AMY2A等與化學(xué)藥作用一致靶標(biāo)。通過(guò)MAS3.0數(shù)據(jù)庫(kù)富集整合UCG、疾病、化學(xué)藥作用靶標(biāo)得到藥物治療疾病密切相關(guān)通路:PPAR、Focal adhesion、Cytokine-cytokine receptor interaction、Jak-STAT signaling pathway和Renal cell carcinoma signaling pathway。提示
4、UCG復(fù)方可能通過(guò)抑制腎小管上皮細(xì)胞增殖,改善腎纖維化,介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫、炎癥反應(yīng),調(diào)控JAK1,JAK2,STAT3的基因達(dá)到改善腎功能目的。
利用多質(zhì)譜組合分析的技術(shù)探究糖腎方的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ),鑒定得到糖腎方中73個(gè)化學(xué)成分,包括黃酮苷類、沒(méi)食子酰基葡萄糖苷、有機(jī)酸、環(huán)烯醚萜苷類、三萜皂苷類及二氫黃酮類成分。糖腎方成分預(yù)測(cè)得到207個(gè)作用靶點(diǎn),并與糖尿病腎病相互關(guān)聯(lián)得到CASP3、LGALS3、VDR等疾病相關(guān)基因,提示糖腎方
5、可能通過(guò)對(duì)以上基因的調(diào)控作用,達(dá)到延緩腎損傷的目的。糖腎方成分與治療疾病化學(xué)藥有 INSR、ACE等一致靶標(biāo),提示復(fù)方通過(guò)作用一致靶標(biāo)發(fā)揮與化學(xué)藥相同藥效。復(fù)方GO分析發(fā)現(xiàn)糖腎方涉及細(xì)胞增殖的調(diào)節(jié)、糖異生、正調(diào)節(jié)糖原生物合成、線粒體、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白活性等分子過(guò)程。糖腎方的通路分析得到Insulin signaling pathway、Fc epsilon RI signaling pathway、VEGF signaling pathway、
6、Th17 cell differentiation等重點(diǎn)通路,推測(cè)其通過(guò)刺激胰島素水平、調(diào)節(jié)免疫炎癥、促進(jìn)血管通透性增強(qiáng)免疫等方面發(fā)揮藥效作用。
本研究將液相色譜-質(zhì)譜技術(shù)與網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)相結(jié)合,采用多質(zhì)譜信息組合策略探究組方成分,初步闡明了復(fù)方的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)?;诰W(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法預(yù)測(cè)復(fù)方成分作用機(jī)制,并與疾病基因,化學(xué)藥靶標(biāo)相結(jié)合,較傳統(tǒng)方法使用復(fù)方配伍藥材所有成分進(jìn)行預(yù)測(cè),效率更高且更具說(shuō)服力。本研究為探究中藥復(fù)方治療疾病的作用
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