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1、目的:觀察蛛網(wǎng)膜下腔注射布比卡因?qū)Υ笫蠹顾柩虼螃?氨基丁酸 A受體 alphal(GABA-ARα1)亞基表達(dá)的影響,探討布比卡因椎管內(nèi)注射產(chǎn)生鎮(zhèn)靜作用的機(jī)制。
方法:雄性SD大鼠32只,體重260±20g,隨機(jī)分為4組:空白對(duì)照組(C組),鹽水對(duì)照組(NC組),0.5%布比卡因10min組(B10組),0.5%布比卡因30min組(B30組),每組8只。C組不做任何處理,取材同下組;其余三組建立大鼠蛛網(wǎng)膜下腔置管模型后,注
2、射生理鹽水或0.5%布比卡因20ul,于相應(yīng)時(shí)點(diǎn)斷頸椎處死取脊髓腰膨大段,分別進(jìn)行尼氏染色、免疫熒光染色,觀察脊髓神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)、GABA-ARα1蛋白在脊髓的分布及檢測(cè)脊髓Ⅱ板層平均光密度的變化;用western-blot檢測(cè)GABA-ARα1亞基蛋白在總蛋白、細(xì)胞漿蛋白及細(xì)胞膜蛋白中表達(dá)的變化。
結(jié)果:1.尼氏染色結(jié)果,鏡下可見(jiàn)各組神經(jīng)元細(xì)胞排列整齊,未見(jiàn)神經(jīng)元形態(tài)改變;2.免疫熒光結(jié)果顯示,GABA-ARα1蛋白主要分布于
3、脊髓灰質(zhì)各板層,高倍鏡下可見(jiàn)細(xì)胞漿及細(xì)胞膜上均有該蛋白存在,以Ⅱ板層分布最為密集,各組之間脊髓Ⅱ板層GABA-ARα1平均光密度值無(wú)顯著改變(P>0.05);3. western-blot檢測(cè)結(jié)果顯示,各組GABA-ARα1亞基在總蛋白中相對(duì)表達(dá)量無(wú)顯著差異(P>0.05);各組細(xì)胞漿蛋白中GABA-ARα1亞基表達(dá)量:B10組、B30組與 C組及NC組相比均顯著下降(p<0.01),且B10組下降更明顯;各組細(xì)胞膜蛋白中GABAARα
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