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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:利用Transwell小室體外趨化模型初步探索人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)胰腺癌細(xì)胞(ASPC-1)的趨向性及其機(jī)制。
方法:取健康成人骨髓用密度梯度離心法分離hMSCs,體外培養(yǎng)、傳代純化。采用免疫組化方法鑒定其表面標(biāo)記(CD73,CD105,CD45)并檢測(cè)ASPC-1表達(dá)SDF-1和hMSCs表達(dá)CXCR4的情況。然后利用Transwell小室觀察ASPC-1、正常胰腺細(xì)胞和無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)基對(duì)hMSCs趨化作用,并觀察加入
2、抗CXCR4抗體后對(duì)hMSCs趨化作用的影響。
結(jié)果:分離出來(lái)的hMSCs表達(dá)CD73和CD105,不表達(dá)CD45;實(shí)驗(yàn)組和正常胰腺細(xì)胞對(duì)照組均觀察到有hMSCs遷移到底膜下表面,但細(xì)胞數(shù)量前者明顯大于后者且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),而空白對(duì)照組未觀察到該現(xiàn)象;SDF-1和CXCR4分別在胰腺癌細(xì)胞和hMSCs表面呈陽(yáng)性表達(dá);加入CXCR4中和型抗體后,ASPC-1對(duì)hMSCs的趨化作用顯著減弱(p<0.05)。
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