高血糖及波動(dòng)性高血糖對(duì)小鼠腹主動(dòng)脈損傷機(jī)制的研究.pdf

1、目的：
　　 本課題通過(guò)檢測(cè)糖尿病小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞中CD34、VEGF蛋白水平的表達(dá),研究CD34、VEGF蛋白表達(dá)與高血糖及波動(dòng)性高血糖的關(guān)系,并分析CD34、VEGF蛋白表達(dá)的相關(guān)性,嘗試從新的角度對(duì)糖尿病血管并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展進(jìn)行初步探討,對(duì)深入闡明波動(dòng)性高血糖促進(jìn)糖尿病慢性血管并發(fā)癥的病理機(jī)制,為糖尿病慢性血管并發(fā)癥的防治開(kāi)辟新的途徑。
　　 方法：
　　 本課題采用前瞻性研究方法,選取10例正常血糖組(對(duì)

2、照組)、20穩(wěn)定性高血糖組和20波動(dòng)性高血糖組(二組為實(shí)驗(yàn)組)小鼠腹主動(dòng)脈組織的石蠟標(biāo)本,采用免疫組化SP法檢測(cè)CD34、VEGF蛋白水平的表達(dá)的表達(dá)。運(yùn)用方差分析、卡方檢驗(yàn)及Spearman等級(jí)相關(guān)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1、HE染色結(jié)果
　　 在光鏡觀察下,通過(guò)對(duì)血管壁比較發(fā)現(xiàn),在穩(wěn)定性高血糖組未發(fā)生明顯血管壁損傷的形態(tài)學(xué)改變,在波動(dòng)性高血糖組僅發(fā)生管壁增厚變硬,平滑肌細(xì)胞增生,少量膠原纖維、彈

3、力纖維和蛋白多糖等結(jié)締組織基質(zhì)形成等形態(tài)學(xué)改變。
　　 2、免疫組化染色結(jié)果
　　 (1)CD34在正常對(duì)照組呈陽(yáng)性或強(qiáng)陽(yáng)性胞質(zhì)內(nèi)或胞膜表達(dá),陽(yáng)性表達(dá)率為90.0％(9/10例),在穩(wěn)定性高血糖組中等強(qiáng)度陽(yáng)性表達(dá)、在波動(dòng)性高血糖組呈弱陽(yáng)性或陰性表達(dá),陽(yáng)性表達(dá)率為35.0％(14/40例),實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組組間比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01):CD34蛋白在穩(wěn)定性高血糖組呈中等強(qiáng)度或弱陽(yáng)性表達(dá),陽(yáng)性表達(dá)率為55.0

4、％(11/20例),而在血糖波動(dòng)組組則呈明顯下調(diào)的弱陽(yáng)性或缺失表達(dá),陽(yáng)性表達(dá)率為15.0％(3/20例),兩組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。
　　 (2)VEGF在正常對(duì)照組中100％呈現(xiàn)細(xì)胞膜的胞質(zhì)或胞膜的缺失表達(dá);在穩(wěn)定性高血糖組中等強(qiáng)度陽(yáng)性及在波動(dòng)性高血糖組呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)出現(xiàn)胞質(zhì)或胞膜的異常表達(dá),其陽(yáng)性表達(dá)率合計(jì)為85.0％(34/40例),實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組比較,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)；VEGF波動(dòng)性高血糖組的異

5、常表達(dá)率(100％(20/20例))明顯高于穩(wěn)定性高血糖組(70.0％(14/20例));統(tǒng)計(jì)分析顯示,VEGF的異常表達(dá)的表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 (3)在血糖正常組腹主動(dòng)脈組織中,CD34與VEGF的異常表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.3250 P=0.0045);
　　 (4)在穩(wěn)定性高血糖組腹主動(dòng)脈組織中,CD34與VEGF的表達(dá)有負(fù)相關(guān)趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(f=-0.1540 P=0.5030);
　　 (

6、5)在波動(dòng)性高血糖組腹主動(dòng)脈組織中,CD34與VEGF的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.2950 P=0.0301);
　　 結(jié)論：
　　 (1)CD34在正常組組織中出現(xiàn)較一致的高表達(dá),而CD34蛋白在穩(wěn)定性高血糖組的中等表達(dá)、在波動(dòng)性高血糖組中明顯低表達(dá)的現(xiàn)象,可以推測(cè)CD34作為早期干/祖細(xì)胞標(biāo)志,在外環(huán)境血糖濃度的變化下能誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子等發(fā)生協(xié)同作用,影響其作為內(nèi)皮細(xì)胞表面的標(biāo)志物的表達(dá),說(shuō)明成體干/祖細(xì)胞在特

7、定的刺激因子作用下的分化可能會(huì)受到抑制。
　　 (2)VEGF在穩(wěn)定性高血糖組和波動(dòng)性高血糖組中顯示有意義的血管內(nèi)皮細(xì)胞異常表達(dá),可能參與了血管內(nèi)皮損傷發(fā)生發(fā)展過(guò)程,且極有可能發(fā)生在早期。VEGF的異常表達(dá)與糖尿病的程度有關(guān)?？梢酝茰y(cè)VEGF在誘導(dǎo)血管病變的發(fā)生和發(fā)展起關(guān)鍵作用,參與血管生成,VEGF可促進(jìn)血管損傷進(jìn)展的速度和程度。在血糖正常組腹主動(dòng)脈組織中,CD34與VEGF的異常表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,提示了VEGF表達(dá)的異常可能

8、是血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)異常的因?yàn)橹弧?br>　　 (4)在穩(wěn)定性高血糖組腹主動(dòng)脈組織中,CD34與VEGF的表達(dá)有負(fù)相關(guān)趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 (5)在波動(dòng)性高血糖組腹主動(dòng)脈組織中,CD34與VEGF的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,提示CD34的異常表達(dá)可能是因?yàn)閮?nèi)皮功能失衡。
　　 (6)在糖尿病早期,血管在形態(tài)學(xué)改變上往往不明顯,因此,在疾病早期尚無(wú)明顯癥狀,但是血管內(nèi)皮功能及相關(guān)蛋白會(huì)出現(xiàn)異常改變,此為糖尿病血管病變發(fā)生