藥物干預(yù)對先天高血糖小鼠腸道菌群的影響.pdf

1、隨著人們生活水平的提高，肥胖、2型糖尿病的發(fā)病率越來越高，嚴(yán)重威脅人類健康。腸道菌群與2型糖尿病的發(fā)生發(fā)展有緊密聯(lián)系，這方面的研究已經(jīng)成為社會和醫(yī)學(xué)界關(guān)注的焦點(diǎn)。
　　 本實(shí)驗(yàn)以自發(fā)性2型糖尿病KKAy小鼠和正常C57BL/6J小鼠為實(shí)驗(yàn)材料，運(yùn)用PCR-DGGE、相似性統(tǒng)計(jì)、克隆條帶測序、基因文庫比對和系統(tǒng)發(fā)育分析等技術(shù)，對兩種小鼠的腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明:兩種基因型小鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)有明顯不同，相似性系數(shù)(C

2、s)只有26％-44％，而基因型相同的小鼠Cs為82％-100％。DGGE圖譜上13個(gè)主要條帶的克隆、測序結(jié)果進(jìn)一步反映了兩種基因型小鼠腸道菌群的區(qū)別。將所有的克隆序列在GenBank和RDP數(shù)據(jù)庫中比對，并做系統(tǒng)發(fā)育樹。我們尋找到一些與2型糖尿病有關(guān)的細(xì)菌，并且對它們的生理功能進(jìn)行闡述。
　　 對整個(gè)藥物試驗(yàn)過程中5個(gè)時(shí)間點(diǎn)的小鼠糞便樣品進(jìn)行PCR-DGGE，通過腸道菌群多樣性的變化和主成分分析研究藥物作用對KKAy小鼠腸道菌

3、群的影響。整個(gè)試驗(yàn)過程中，正常組和中藥高劑量組小鼠的腸道菌群多樣性保持在較高水平，并且都比較穩(wěn)定；中藥低劑量組茵群多樣性高于模型對照組和吡格列酮組，吡格列酮組腸道菌群多樣性下降最快。在主成分分析中，吡格列酮對腸道菌群的影響是單方向的，而益氣化濁膠囊是多方向的。結(jié)果顯示，益氣化濁膠囊對腸道菌群的作用有別于吡格列酮，前者在維持腸道菌群多樣性和改善腸道菌群結(jié)構(gòu)方面更具有優(yōu)勢。
　　 運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，對比不同時(shí)期各組小鼠腸道

4、中擬桿菌和乳桿菌的數(shù)量。給藥后30天，中藥高、低劑量組小鼠腸道中擬桿菌數(shù)量下降，接近正常組水平，而模型對照組和吡格列酮組沒有變化，仍然保持較高水平。整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間，模型對照組乳桿菌數(shù)量下降，其他組明顯上升。這說明益氣化濁膠囊對擬桿菌數(shù)量有特殊的調(diào)節(jié)作用，而乳桿菌數(shù)量的增加可以緩解2型糖尿病病情。
　　 腸道微生物隱藏著很多生物奧秘，需要我們運(yùn)用更多更先進(jìn)的技術(shù)進(jìn)行研究。此外，鑒于益氣化濁膠囊的特殊功效，我們相信中藥輔助治療2型糖尿