通幽湯及其拆方抑制人食管癌細胞EC9706 EGFR-PLC-γ1信號轉(zhuǎn)導通路的研究.pdf

1、目的：通過觀察通幽湯及其活血行氣、滋養(yǎng)陰血拆方對人食管癌細胞EC9706的增殖抑制作用和對EGFR-PLC-γ1信號轉(zhuǎn)導通路的影響，探討通幽湯治療食管癌的分子機理，闡明食管癌中醫(yī)病機的部分內(nèi)涵。 方法：采用人食管癌細胞EC9706為實驗對象，用通幽湯及其活血行氣、滋養(yǎng)陰血拆方處理細胞，在倒置顯微鏡下觀察EC9706細胞形態(tài)的改變；用MTT法檢測對EC9706細胞生長的影響；用Westernblot檢測EC9706細胞EGFR、P

2、LC-γ1、PKCα蛋白表達水平和蛋白酪氨酸磷酸化水平。 結(jié)果：1.通幽湯及其活血行氣拆方對EC9706細胞增殖有明顯抑制作用，與對照組相比，全方組和活血行氣組細胞增長緩慢，形體偏小、皺縮，細胞間隙加大；培養(yǎng)基內(nèi)細胞殘片增多，細胞集落變小，匯合率低?；钛袣饨M較全方組作用更強，并隨劑量增加而加重。滋養(yǎng)陰血組細胞形態(tài)與對照組相似，增殖較快，僅在大劑量作用下方顯示出很弱的抑制作用。表明活血行氣藥物在通幽湯體外抑制食管癌細胞增殖中起主

3、要作用。 2.量效關(guān)系實驗顯示活血行氣組和全方組隨藥物濃度增加而抑制率增高，全方組最大抑制率為71.5％，活血行氣組最大抑制率為81％，二者都有明顯的時間依賴關(guān)系，以活血行氣組作用最好，全方組次之，滋養(yǎng)陰血方對食管癌細胞的作用則很不穩(wěn)定，各劑量組偏移較大。 3.在人食管癌EC9706細胞可檢測到較高的EGFR、PLC-γ1、PKCα蛋白分子表達。通幽湯及其活血行氣拆方能夠不同程度地抑制EGFR-PLCγ1信號通路各蛋白表

4、達水平，以活血行氣組作用最強，全方組次之。滋養(yǎng)陰血組對上述指標無明顯抑制作用。 結(jié)論：1.通幽湯及其活血行氣拆方均能明顯抑制人食管癌細胞EC9706的生長，以活血行氣方效果最好。 2.食管癌病變和EGFR-PLC-γ1信號轉(zhuǎn)導通路中各蛋白表達增強有關(guān)。 3.通幽湯及其活血行氣拆方可能通過抑制EC9706細胞EGFR-PLC-γ1信號轉(zhuǎn)導通路中各信號蛋白表達而抑制食管癌細胞增殖。 4.以方測證，在食管癌病變