活血清熱利濕方及其拆方抑制人子宮頸癌細(xì)胞SiHa EGFR-PLC-γ1-PKCα信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究.pdf

1、目的:通過觀察活血清熱利濕方(簡稱W)及其拆方活血組(簡稱H:蚤休、川楝子)、清熱組(簡稱Q:知母、白頭翁)、利濕組(簡稱:萆薢、五倍子)對子宮頸癌細(xì)胞SiHa增殖抑制和EGFR-PLC-γ1-PKCα信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響,研究活血、清熱、利濕法治療子宮頸癌的機(jī)理,探討?zhàn)鲅?、熱毒及痰濕與子宮頸癌病變和EGFR-PLC-γ1-PKCα信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的關(guān)系。
　　方法:采用人子宮頸癌細(xì)胞SiHa為實(shí)驗(yàn)對象,用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并計算

2、細(xì)胞抑制率,以篩選出有效的藥物;用正交試驗(yàn)優(yōu)選出療效最好的方劑;設(shè)對照組和用活血清熱利濕全方及其三個拆方處理細(xì)胞,在倒置顯微鏡下觀察SiHa細(xì)胞生長及形態(tài)改變,用Western blot檢測SiHa細(xì)胞EGFR-PLC-γ1-PKCα信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路各蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:1.活血清熱利濕方及其拆方對SiHa細(xì)胞增殖明顯抑制,對細(xì)胞形態(tài)作用明顯不同,清熱組細(xì)胞疏松膨脹,細(xì)胞變成圓球形,胞內(nèi)充滿大量顆粒狀或空泡樣物質(zhì),皿中有少量細(xì)

3、胞碎片細(xì)胞間隙加大;活血組細(xì)胞表面粗糙、皺縮,透光度低,形態(tài)不規(guī)則,皿中視野可見有許多細(xì)胞碎片,并可見較多漂浮發(fā)亮的圓形細(xì)胞;利濕組可見細(xì)胞皺縮,透光度減低,形態(tài)不規(guī)則,貼壁性變差,細(xì)胞碎片增多;全方組細(xì)胞形態(tài)與活血組和利濕組較為接近,細(xì)胞表面粗糙,多數(shù)細(xì)胞呈現(xiàn)不規(guī)則形態(tài),皿中有大量的細(xì)胞碎片。2.活血清熱利濕全方及其拆方均能抑制SiHa細(xì)胞生長,全方作用最強(qiáng),隨藥物濃度的增加,對細(xì)胞生長抑制呈現(xiàn)劑量—效應(yīng)依賴關(guān)系。3.人子宮頸癌SiH

4、a細(xì)胞可檢測到EGFR、PLC-γ1、PKCα蛋白分子的過度表達(dá)。4.當(dāng)用IC50藥物劑量處理細(xì)胞時,活血清熱利濕全方及其拆方均能抑制EGFR-PLC-γ1-PKCα信號轉(zhuǎn)導(dǎo)各蛋白表達(dá)水平,其作用強(qiáng)弱依次為W>H>Q>L。
　　結(jié)論:1.活血清熱利濕方及其拆方對于人子宮頸癌細(xì)胞SiHa的增殖有著明顯的抑制作用,而其中又以全方組的效果最明顯;活血組、清熱組次之、利濕組效果較一般。2.子宮頸癌的發(fā)病與EGFR-PLC-γ1-PKCα的