清熱化痰方及其拆方調(diào)節(jié)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞SHG-44 EGFR-PI3K-Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究.pdf

1、目的:通過(guò)觀察清熱化痰方(以下簡(jiǎn)稱W)及其兩個(gè)拆方,清熱方(以下簡(jiǎn)稱Q),化痰方(以下簡(jiǎn)稱H)對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞SHG-44增殖抑制和EGFR-PI3K-Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響,研究清熱、化痰法治療人腦膠質(zhì)瘤的機(jī)理,探討熱毒及痰凝與人腦膠質(zhì)瘤病變和EGFR-PI3K-Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的關(guān)系。
　　方法:采用人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞SHG-44為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,MTT法計(jì)算細(xì)胞抑制率,篩選出有效藥物;選用正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)選出

2、療效最佳的方劑;設(shè)對(duì)照組和用清熱化痰方及其兩個(gè)拆方處理細(xì)胞,在倒置顯微鏡下觀察SHG-44細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)及形態(tài)改變,用Westernblot檢測(cè)各藥物組對(duì)SHG-44細(xì)胞EGFR-PI3K-Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路各蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:①清熱化痰方及其拆方對(duì)SHG-44細(xì)胞增殖顯著抑制,對(duì)細(xì)胞形態(tài)較大影響,清熱組多數(shù)細(xì)胞縮小,細(xì)胞間隙加大,不少細(xì)胞發(fā)生空泡變性;化痰組細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變,部分變圓,細(xì)胞表面粗糙,透光度減低,貼壁性變差

3、;全方組細(xì)胞表面粗糙,細(xì)胞縮小,變圓,呈現(xiàn)空泡樣結(jié)構(gòu)。②清熱化痰方及其拆方均能抑制SHG-44細(xì)胞生長(zhǎng),全方作用最強(qiáng),隨藥物濃度、時(shí)間的增加,對(duì)細(xì)胞增殖抑制呈現(xiàn)劑量-效應(yīng)與時(shí)間-效應(yīng)依賴關(guān)系。③人腦膠質(zhì)瘤SHG-44細(xì)胞可檢測(cè)到EGFR、PI3K、Akt蛋白分子的過(guò)度表達(dá)。④當(dāng)用IC50藥物濃度處理細(xì)胞時(shí),清熱化痰方及其拆方均能下調(diào)EGFR-PI3K-Akt信號(hào)通路各蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)論:①清熱化痰方及其拆方均能顯著抑制人腦膠