siRNA法下調(diào)PRL-3對腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞SHG-44生長周期的影響.pdf

1、目的
　　通過siRNA法下調(diào)PRL-3研究其對在腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞SHG-44生長周期的影響。
　　腦膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)常見的惡性腫瘤，來源于星型細(xì)胞或少突膠質(zhì)細(xì)胞，是發(fā)生于神經(jīng)外胚層的腫瘤.無論是低級別膠質(zhì)瘤還是高級別膠質(zhì)瘤，其生長方式均為浸潤性生長，手術(shù)無法徹底清除，需要結(jié)合放療、化療、生物治療等綜合手段來延長病人生存期。膠質(zhì)瘤總的治療效果尚不佳。為此，需要更多篩選靶向藥物，以找到能特異性針對膠質(zhì)瘤組織，而不影響正常組織，既能殺死

2、膠質(zhì)瘤細(xì)胞，也能殺滅“腫瘤干細(xì)胞”;既能進入腫瘤組織內(nèi)部，又無免疫逃避障礙。另外。生產(chǎn)工藝簡單、價格低廉和易于保存及運輸?shù)纫残枰紤]的因素。多通路靶向治療藥物的聯(lián)合應(yīng)用將成為未來治療膠質(zhì)瘤的發(fā)展方向[1-7]。
　　基因治療是生物治療的一種，其中小RNA干擾是其重要組成部分。RNA干擾的優(yōu)越性包括普遍性、高效性、特異性。大量的細(xì)胞培養(yǎng)和動物模型實驗證實RNA干擾的機制存在于不同物種的細(xì)胞中，siRNA可在多種器官的細(xì)胞中，包括神經(jīng)

3、系統(tǒng)，抑制特異基因的表達，并且從理論上而言幾乎所有的基因都能通過RNA干擾而被沉默，RNA抑制目標(biāo)基因表達的效能非常高[8-11]。
　　PRL-3蛋白酪氨酸磷酸酶家族成員。同一家族的3名成員PRL-1，PRL-2，PRL-3在基因序列和氨基酸序列上具有高度的同源性，提示它們在功能上具有類型和功能的互補性。PRL-3在腫瘤中的作用最先從消化道腫瘤開始，研究發(fā)現(xiàn)結(jié)腸癌的肝轉(zhuǎn)移灶中PRL-3出現(xiàn)高表達，還有在胃癌中也出現(xiàn)了PRL-3的

4、高表達[12-15]。
　　有文獻報道[16]，其PRL-3通過脫磷酸及其COOH末端定位于細(xì)胞質(zhì)膜等一系列的作用，發(fā)揮促進腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲及腫瘤血管生成的作用。已有研究證實證明腦膠質(zhì)瘤中PRL-3高表達，它能促進膠質(zhì)瘤的增值和侵襲，我們通過siRNA干涉的方式下調(diào)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞SHG-44中PRL-3表達，同時我們的實驗要證明PRL-3表達的下調(diào)能夠?qū)HG-44細(xì)胞增殖產(chǎn)生抑制作用，對其凋亡產(chǎn)生促進作用。PRL-3在腦膠質(zhì)瘤中

5、發(fā)揮著重要的作用，目前PRL-3已經(jīng)成為腫瘤靶向治療的重要分子，隨著研究的深入，其很可能成為腦膠質(zhì)瘤治療的新的靶點，為腦膠質(zhì)瘤的治療提供新的選擇。
　　方法
　　采用siRNA干涉的方法下調(diào)腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞SHG-44中PRL-3表達水平，通過westernblot方法檢測干涉效果，繪制細(xì)胞生長曲線、流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期及凋亡以觀察下調(diào)PRL-3對腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株SHG-44細(xì)胞的影響。
　　結(jié)果
　　Weste