泌乳素調(diào)節(jié)的NK-92細(xì)胞抗人子宮頸癌細(xì)胞體內(nèi)外研究.pdf

1、目的：探討放射線照射后NK-92細(xì)胞和泌乳素調(diào)節(jié)的NK-92(rhPRL-NK-92)細(xì)胞抗人子宮頸癌細(xì)胞的安全性與有效性。 方法：實驗一、放射線照射后NK-92細(xì)胞抗人子宮頸癌細(xì)胞的安全性和有效性。1細(xì)胞計數(shù)法檢測照射后NK-92細(xì)胞的增殖情況。 251Cr釋放法檢測NK-92細(xì)胞對HeLa細(xì)胞和K562細(xì)胞的體外殺傷活性。 3FACS檢測照射前后NK-92細(xì)胞主要表面標(biāo)志CD56表達(dá)情況。 4照射后N

2、K-92細(xì)胞輸注NOD/SCID鼠體內(nèi)，觀察其成瘤性。 5建立人子宮頸癌NOD/SCID鼠腫瘤模型。 6利用放射線照射后NK-92細(xì)胞治療荷瘤鼠，觀察療效。 實驗二、放射線照射后rhPRL-NK-92細(xì)胞抗人子宮頸癌細(xì)胞的安全性與有效性。1MTT法檢測不同劑量泌乳素對NK-92細(xì)胞外增殖影響。 2MTT法檢測rhPRL-NK-92細(xì)胞對HeLa細(xì)胞的體外殺傷活性。 3MTT法檢測不同劑量泌乳素對H

3、eLa細(xì)胞體外增殖影響。 4照射后rhPRL-NK-92細(xì)胞輸注NOD/SCID鼠體內(nèi)，觀察其成瘤性。 5利用放射線照射后rhPRL-NK-92細(xì)胞治療荷瘤鼠，觀察療效。 結(jié)果：1.400cGy劑量的放射線照射可以抑制體外培養(yǎng)NK-92細(xì)胞的增殖能力。 2.400cGy放射線劑量范圍內(nèi)，NK-92細(xì)胞的殺傷活性無明顯降低。 3.400cGy劑量放射線照射后，NK-92細(xì)胞表面主要標(biāo)志無變化。

4、 4.400cGy劑量放射線照射后的NK-92細(xì)胞輸注NOD/SCID鼠體內(nèi)是安全的。 5.400cGy劑量放射線照射后的NK-92細(xì)胞輸注荷瘤鼠體內(nèi)可明顯減小瘤體積，并延長其生存期。 6.微量IL-2(5U/ml)存在時，100ng/mlrhPRL對NK-92細(xì)胞促增殖作用最佳。 7.微量IL-2(5U/ml)存在時，100ng/mlrhPRL對NK-92細(xì)胞促殺傷作用最佳。 8.400cGy放射線劑

5、量范圍內(nèi)，rhPRL-NK-92細(xì)胞的殺傷活性無明顯降低。 9.400cGy劑量放射線照射后的rhPRL-NK-92細(xì)胞輸注NOD/SCID鼠體內(nèi)是安全的。 10.400cGy劑量放射線照射后的rhPRL-NK-92細(xì)胞輸注荷瘤鼠體內(nèi)可明顯減小瘤體積。 結(jié)論：體外和動物體內(nèi)試驗證實放射線照射后NK-92細(xì)胞和rhPRL-NK-92細(xì)胞可以有效抗人子宮頸癌細(xì)胞，其中rhPRL-NK-92細(xì)胞抗癌效應(yīng)相對于NK-92