版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、大腸桿菌是人和動(dòng)物腸道中的常居菌,常隨人及動(dòng)物糞便一塊排出,廣泛傳播于自然環(huán)境中,對(duì)水資源造成污染。大部分大腸桿菌沒(méi)有致病性,但是部分能產(chǎn)生腸毒素,導(dǎo)致人體腸胃炎等疾病。特別是O157型的大腸桿菌會(huì)引起腹瀉、出血性大腸炎和溶血尿毒癥等疾病。在衛(wèi)生質(zhì)量的評(píng)價(jià)和控制中,通常采用大腸桿菌作為指示菌來(lái)了解水體的受污染狀況,從而評(píng)價(jià)其質(zhì)量以保證衛(wèi)生安全。因此,建立水體中大腸桿菌的快速檢測(cè)方法,成為環(huán)境保護(hù)、飲水衛(wèi)生、食品衛(wèi)生和流行病學(xué)領(lǐng)域中最重要
2、的研究對(duì)象之一。
大腸桿菌的傳統(tǒng)檢測(cè)方法,如濾膜法、多管發(fā)酵法等,雖然結(jié)果比較準(zhǔn)確,但是都存在著檢測(cè)周期長(zhǎng)、程序復(fù)雜、所需試劑繁多等缺點(diǎn)。目前,國(guó)內(nèi)外研究人員已經(jīng)發(fā)展一些新方法對(duì)大腸桿菌進(jìn)行快速檢測(cè),主要包括酶底物法、聚合酶鏈法、免疫分析法、電化學(xué)方法、熒光法等。這些方法雖然縮短了檢測(cè)時(shí)間,簡(jiǎn)化了檢測(cè)流程,但是普遍降低了檢測(cè)的靈敏度和選擇性。因此研究發(fā)展一種既快速,又能保持高靈敏度、高選擇性的大腸桿菌檢測(cè)方法成了專(zhuān)家學(xué)者的
3、重點(diǎn)研究方向。
本文將納米技術(shù)、生物技術(shù)與電化學(xué)分析技術(shù)三者有機(jī)結(jié)合,運(yùn)用多壁碳納米管(MWNTs)和磁性納米顆粒等納米材料制備了MWNTs/Nafion生物傳感器以快速檢測(cè)大腸菌群,檢測(cè)時(shí)間可控制在5h之內(nèi),檢測(cè)限低至10cfu/mL。根據(jù)納米顆粒良好的生物兼容性,又將生物功能化的Au納米標(biāo)記物和CdS納米標(biāo)記物與免疫磁珠技術(shù)相結(jié)合發(fā)展了一種快速、靈敏、特異性的大腸桿菌快速檢測(cè)方法,可獲得較低的檢測(cè)限(30cfu/mL)
4、和較短的檢測(cè)時(shí)間(約2h)。論文主要包括以下四個(gè)部分:
第一章緒論
本章簡(jiǎn)要介紹了大腸桿菌的生物特性、致病性以及衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。總結(jié)了檢測(cè)大腸桿菌的傳統(tǒng)方法以及酶底物法、聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)、免疫檢測(cè)技術(shù)和化學(xué)發(fā)光法等新方法。然后回顧了納米材料的特性、制備和表征方法,并就納米材料在快速檢測(cè)大腸桿菌中的應(yīng)用展開(kāi)了討論。
第二章 MWNTs/Nafion生物傳感器的制各及其在快速檢測(cè)大腸桿菌中的應(yīng)用
5、 本章制備了多壁碳納米管(MWNTs)/Nafion復(fù)合膜修飾玻碳電極,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)大腸桿菌的快速安培檢測(cè)。由于Nafion具有陽(yáng)離子交換能力以及MWNTs的電催化能力,從而使MWNTs/Nafion修飾電極提高了對(duì)氨基酚(PAP)的檢測(cè)靈敏度;對(duì)大腸桿菌進(jìn)行濃縮和預(yù)培養(yǎng)可以進(jìn)一步提高其檢測(cè)靈敏度。該修飾電極能存5小時(shí)內(nèi)檢測(cè)出10~104cfu/mL的大腸桿菌,而且MWNTs/Nafion修飾電極很容易制備,電極表面可以實(shí)現(xiàn)再生。此外
6、,對(duì)實(shí)際水樣進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果與平板技術(shù)法相比較,具有良好的一致性。
第三章 Au納米標(biāo)記物增強(qiáng)電化學(xué)免疫分析大腸桿菌的研究
本章在Au納米顆粒表面修飾辣根過(guò)氧化酶(HRP)標(biāo)記的大腸桿菌抗體從而制備了一種新型的Au納米標(biāo)記物,并將該納米標(biāo)記物應(yīng)用于增強(qiáng)電化學(xué)免疫分析大腸桿菌。經(jīng)酶聯(lián)免疫反應(yīng)后,Au納米標(biāo)記物、免疫磁性顆粒(IMB)和大腸桿菌形成了IMB/抗體-大腸桿菌-Au納米標(biāo)記物的三明治式免疫復(fù)合物。以3,
7、3,5,5-四甲基聯(lián)苯二胺(TMB)溶液作為底物,采用電化學(xué)與流動(dòng)注射檢測(cè)(FIA)相結(jié)合的技術(shù)測(cè)定HRP的活性。檢測(cè)到的電流大小與免疫復(fù)合物上HRP的量成正比,從而與大腸桿菌的濃度成正比。Au納米顆粒增加HRP的負(fù)載量,增強(qiáng)了電化學(xué)信號(hào),大大提高了大腸桿菌的檢測(cè)靈敏度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,大腸桿菌濃度在1.0×102~5.0×104cfu/mL范圍內(nèi)與電流大小成線性相關(guān),最低檢測(cè)限達(dá)50cfu/mL,總的分析時(shí)間比其他方法短,在1h內(nèi)就能完
8、成對(duì)大腸桿菌的快速檢測(cè)。
第四章基于CdS納米標(biāo)記物磁性電化學(xué)免疫測(cè)定水體中的大腸桿菌
本章發(fā)展了一種磁性分離技術(shù)與電化學(xué)免疫檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合快速檢測(cè)水體中大腸桿菌濃度的方法。本方法把免疫磁性顆粒(IMB)用于捕獲和分離大腸桿菌,半導(dǎo)體納米粒子CdS量子點(diǎn)(QDs)通過(guò)交聯(lián)反應(yīng)與大腸桿菌抗體相結(jié)合制備成CdS納米標(biāo)記物,并將該納米標(biāo)記物應(yīng)用于增強(qiáng)電化學(xué)免疫檢測(cè)水體中的大腸桿菌。經(jīng)過(guò)酶聯(lián)免疫反應(yīng),CdS納米標(biāo)記物
9、、免疫磁性顆粒(IMB)和大腸桿菌形成了IMB/抗體-大腸桿菌-CdS納米標(biāo)記物的三明治式免疫復(fù)合物。然后用電化學(xué)方波伏安法(SWV)痕量測(cè)定從免疫復(fù)合物上檢測(cè)從酸洗下來(lái)的Cd離子。檢測(cè)到的電流大小與免疫復(fù)合物上Cd濃度的量成正比,從而與大腸桿菌的濃度成正比。用這種基于CdS納米標(biāo)記物磁性電化學(xué)免疫分析的方法,減小了非特異性吸附,并大大增強(qiáng)電化學(xué)信號(hào),從而提高了大腸桿菌的檢測(cè)靈敏度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,大腸桿菌濃度在5.0×101~1.0×1
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 水體中大腸桿菌快速檢測(cè)方法和儀器的研究.pdf
- 納米電極的制備及其在快速檢測(cè)水體中大腸桿菌的電分析化學(xué)研究.pdf
- 電分析化學(xué)方法用于水體中大腸桿菌快速檢測(cè)的應(yīng)用研究.pdf
- 水體中大腸桿菌的檢測(cè)分析新方法研究.pdf
- 醫(yī)藥廢水中大腸桿菌免疫快速檢測(cè)方法研究.pdf
- 水體中大腸桿菌富集新方法的建立.pdf
- 基于納米材料的電化學(xué)DNA生物傳感器在快速檢測(cè)大腸桿菌中的應(yīng)用和研究.pdf
- 船舶生活污水大腸桿菌快速檢測(cè)系統(tǒng)研究.pdf
- 基于印刷叉指微電極快速檢測(cè)食品中大腸桿菌和黃曲霉毒素.pdf
- 食品中大腸桿菌O157:H7檢測(cè)研究.pdf
- 磁性富集熒光法快速檢測(cè)大腸桿菌的研究.pdf
- 基于納米材料的大腸桿菌檢測(cè)及抗菌肽遞送系統(tǒng)的研究.pdf
- 水中納米材料和重金屬對(duì)大腸桿菌的毒性研究.pdf
- gfp在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達(dá)和檢測(cè)解析
- 快速檢測(cè)豬肉中大腸桿菌O157-H7膠體金免疫層析試紙條的研究.pdf
- 雞場(chǎng)土壤中大腸桿菌的檢測(cè)與化學(xué)消毒劑的篩選.pdf
- 大腸桿菌K88可視化快速檢測(cè)方法的研究.pdf
- 快速檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品中大腸桿菌O157-H7的生物傳感方法與儀器研究.pdf
- 實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)血中大腸桿菌的方法學(xué)及在外科的初步應(yīng)用.pdf
- 功能納米材料-血紅素對(duì)酪氨酸和大腸桿菌作用的研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論