免疫磁球的制備及其在大腸桿菌檢測中的應用.pdf

1、免疫磁球是在表面上包被有抗原或抗體的，具有超順磁性、大小單一的磁性微球的統(tǒng)稱。除了具有磁性外，免疫磁球還具有與靶分子特異性結(jié)合的能力。通過在表面包被不同的抗體或抗原，免疫微球可以與樣本中的不同物質(zhì)發(fā)生特異性結(jié)合，進而達到快速分離富集或者檢測的目的。免疫磁球的獨特性能使其在環(huán)境工程和生物技術(shù)領域中具有良好的應用前景。
　　本論文以實驗室自制的磁性微球為載體，包被抗體制成免疫磁球?？疾炝舜判晕⑶蝾愋汀⒖勾疟?、包被時間、活化劑以及包被緩

2、沖液類型對免疫磁球上抗體包被量的影響，并對所制備的免疫磁球進行了穩(wěn)定性評價，確定了免疫磁球制備的最優(yōu)條件，測定了在最優(yōu)條件下所制備的免疫磁球上的抗體包被量。最后應用自制的免疫磁球去檢測水中大腸桿菌的濃度，確定了檢測的工作濃度，靈敏度和檢測限，并考察了封閉液和樣本離子強度對檢測方法的影響。
　　實驗結(jié)果表明，當載體為聚苯乙烯/丙烯酰胺磁性微球，包被緩沖液為0.1mol/L Tris溶液，抗/磁比為20mg/g，包被時間2h，不使用活

3、化劑時，免疫磁球上交聯(lián)的抗體量最多，達4.72mg/g；免疫磁球的穩(wěn)定性評價結(jié)果顯示，活化劑的使用能夠增強免疫磁球的穩(wěn)定性，但是同時抗體包被量有明顯下降；當超聲分散前處理磁性微球15min時，與未經(jīng)處理相比，所制備的免疫磁球穩(wěn)定性有明顯提高。
　　利用自制的免疫磁球，采用夾心法檢測大腸桿菌稀釋液的濃度。當使用3％牛血清白蛋白做封閉液，在37℃，150rpm的條件下封閉30min后，免疫磁球的信噪比最高，達1.87。菌液樣本離子濃度