真菌誘導(dǎo)子對鐵皮石斛原球莖生長及次生代謝產(chǎn)物的影響.pdf

1、根據(jù)該植物與真菌形成菌根的特點,本論文對鐵皮石斛原球莖與小菇屬真菌MF24(Mycenasp.)誘導(dǎo)子的相互作用進(jìn)行了系統(tǒng)研究;對MF24誘導(dǎo)子處理鐵皮石斛原球莖、對照鐵皮石斛原球莖、鐵皮石斛原藥材和金釵石斛原藥材的化學(xué)成分進(jìn)行了分析比較;對誘導(dǎo)子處理的鐵皮石斛原球莖的次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行了研究;并以分離得到的鐵皮石斛原球莖中的化學(xué)成分為標(biāo)準(zhǔn),應(yīng)用HPLC法分析了誘導(dǎo)子處理對原球莖中這些成分含量的影響,為解決鐵皮石斛資源緊缺問題開辟新途徑.

2、一、獲得了真菌誘導(dǎo)子在鐵皮石斛原球莖培養(yǎng)中的最佳工藝首次以來源于鐵皮石斛的小菇屬內(nèi)生真菌MF24(M.ycena sp.)為誘導(dǎo)子,對鐵皮石斛原球莖與誘導(dǎo)子在固體培養(yǎng)基上相互作用過程中誘導(dǎo)子的處理方法、使用劑量、加入時間及與原球莖作用時間等因素對原球莖生長及次生代謝產(chǎn)物的影響進(jìn)行了系統(tǒng)研究,獲得二者相互作用的最佳工藝為:以MF24菌麥麩液體培養(yǎng)基搖床發(fā)酵培養(yǎng)的發(fā)酵液為誘導(dǎo)子,以250mL·L<'-1>(誘導(dǎo)子·培養(yǎng)基<'-1>)的劑量加

3、入以1/2MS土豆固體培養(yǎng)基光照培養(yǎng)16周的鐵皮石斛原球莖中,繼續(xù)培養(yǎng)6周后收獲.與單獨培養(yǎng)的原球莖相比,在此條件下培養(yǎng)的原球莖鮮重提高了50%,干重提高了28%,總生物堿含量提高了12%.這一工作為今后鐵皮石斛原球莖工業(yè)化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ).二、應(yīng)用HPLC-MS技術(shù)分析研究了石斛的化學(xué)成分鐵皮石斛和金釵石斛中生物堿類成分的相對積分面積和分別為6.04%和43.15%;共有的25個相同的化學(xué)成分,相對積分面積和分別為97.12%和50.0

4、9%;這些成分中鐵皮石斛有23個成分的含量和相對含量高于金釵石斛.三、應(yīng)用HPLC技術(shù)分析誘導(dǎo)子對鐵皮石斛原球莖單體化合物含量的影響以N-阿魏酰酪胺為標(biāo)準(zhǔn)品,應(yīng)用HPLC方法檢測MF24菌誘導(dǎo)子對鐵皮石斛原球莖中N-阿魏酰酪胺含量的影響,結(jié)果表明:對照鐵皮石斛原球莖和鐵皮石斛原藥材的N-阿魏酰酪胺含量接近,誘導(dǎo)子處理比對照原球莖中N-阿魏酰酪胺的含量提高了90.6%.這一結(jié)果更進(jìn)一步證明了誘導(dǎo)子處理對鐵皮石斛原球莖的化學(xué)成分有影響,能提