鐵皮石斛類原球莖生物反應(yīng)器培養(yǎng)體系構(gòu)建.pdf

1、本試驗以鐵皮石斛類原球莖為材料，用不同光照強度、不同培養(yǎng)時間對鐵皮石斛類原球莖生物量和主要有效成分多糖、生物堿的積累進行研究;同時探索影響鐵皮石斛PLBs生物反應(yīng)器培養(yǎng)的條件;并在此基礎(chǔ)上對反應(yīng)器內(nèi)各種理化性質(zhì)的變化與類原球莖生長量的變化及多糖積累之間的關(guān)系進行研究。研究結(jié)果如下:
　　 1.鐵皮石斛類原球莖生物量的增加在光照強度≥2000Lx下培養(yǎng)40～50d均較高，生產(chǎn)上需要類原球莖維持旺盛的分裂，獲得最佳生物量的培養(yǎng)條件為

2、光照強度2000Lx下培養(yǎng)40d，生物量達到0.74g;多糖含量以光照強度2000Lx下培養(yǎng)30d最高，達到16.88％;生物堿含量以光照強度500Lx下培養(yǎng)30d最佳，達到0.028％。
　　 2.在懸浮培養(yǎng)條件下，利于鐵皮石斛類原球莖增殖和多糖積累的培養(yǎng)基組分為:1/2MS基本培養(yǎng)基添加1mg.L-1NAA、5％椰乳、3％蔗糖，pH值為6.0。接種量為40g·L-1，采用孔徑為15μm的多孔噴頭，通氣量用0.10cc·min

3、-1和0.05cc·min-1交替使用等培養(yǎng)條件有效地提高類原球莖增殖系數(shù)和多糖含量。
　　 3.對多糖積累機理的研究發(fā)現(xiàn):培養(yǎng)36～42d鐵皮石斛類原球莖的鮮質(zhì)量和干質(zhì)量達最大值，多糖及生物堿含量分別在42d和36d的培養(yǎng)時間下達最高，分別為24.03％和0.056％;在36d的培養(yǎng)周期內(nèi)，液體培養(yǎng)基中的蔗糖濃度隨著培養(yǎng)時間的延長開始轉(zhuǎn)化為葡萄糖和果糖，在培養(yǎng)20d之后，培養(yǎng)基中的蔗糖濃度降至2.0mg·ml-1，而葡萄糖和果

4、糖含量在18d達到最高值，隨后開始下降;同時對培養(yǎng)基中元素含量的測定發(fā)現(xiàn)，N、P、K、Mg、Ca、Zn、Cu、Mn、B等元素含量均下降，其中P、Mg、Ca、Zn、Mn被大量利用。
　　 4.在生物反應(yīng)器培養(yǎng)中，接種量為80g·L-1利于鐵皮石斛類原球莖鮮質(zhì)量的凈增長和多糖的積累;球形生物反應(yīng)器較其他形狀反應(yīng)器能夠更有效的促進類原球莖增殖和多糖積累;通氣量則以2.0cc·min-1處理效果最佳;培養(yǎng)過程中，由于營養(yǎng)物質(zhì)的大量消耗，