食品鏈中激素與抗生素類藥物殘留檢測技術及標準化研究.pdf

1、民以食為天，食以安為先。食品安全風險監(jiān)測對于保障人的健康至關重要。本論文針對當前食品鏈中濫用激素和抗生素導致大量藥物殘留引發(fā)食品安全風險的現(xiàn)實問題，綜述了食品鏈中激素與抗生素的危害和來源、藥物殘留的狀況、現(xiàn)存風險因素、檢測技術現(xiàn)狀。本論文旨在建立和發(fā)展高靈敏、高通量、高選擇性檢測食品鏈中激素與抗生素類藥物殘留的有效的新方法和方法的標準化?；诂F(xiàn)代分離分析技術(HPLC, GC-MS and RRLC-MS/MS)，重點研究了牛乳中活性β

2、-內酰胺酶類抗生素拮抗劑的檢測技術和方法標準化、飼料中4種β-內酰胺類抗生素的檢測技術和方法標準化、豬肉中21種磺胺類藥物與代謝物的檢測技術、嬰幼兒配方奶粉中6種雌激素殘留的質譜解析、食品包裝材料中雙酚 A環(huán)境激素遷移量的檢測技術等。本論文所提出的這些方法，其分析特性符合方法學的要求。其中，β-內酰胺酶類抗生素拮抗劑的檢測和4種β-內酰胺類抗生素的檢測技術現(xiàn)已成為河北省地方標準。
　　本論文提出了原乳中活性β-內酰胺酶拮抗劑的快速

3、高分離液相色譜-串聯(lián)質譜（RRLC-MS/MS）的定性檢測新方法。利用活性β-內酰胺酶能夠酶解青霉素族藥物的原理，在原乳中加入一定量氨芐青霉素，酶解1h后，檢測原乳中氨芐青霉素酶解率，定性活性目標物的存在。試樣中氨芐青霉素經乙腈溶液提取，HLB固相萃取柱凈化和濃縮后，RRLC-MS/MS多反應監(jiān)測模式定性、定量分析。該方法對活性β-內酰胺酶檢出限為4U/mL，對原乳中添加1mg/kg水平氨芐青霉素的加標回收率在92.3％～95.5％之間

4、，相對標準偏差 RSD（n=6）5.4％～8.1％之間,并按照國家標準起草程序實現(xiàn)標準化，形成河北省地方標準（DB13/T1080-2009）。
　　本論文發(fā)展了青霉素G、青霉素V、氨芐西林、阿莫西林4種β-內酰胺類藥物的快速高分離液相色譜-串聯(lián)質譜（RRLC-MS/MS）測定方法。試樣加入去離子水高速離心，上清液經HLB固相萃取柱凈化，以甲醇洗脫，洗脫液氮吹吹干，乙腈定容待測。本方法線性在0-16mg/L之間，線性相關系數(shù)R均大

5、于0.9999，青霉素G和青霉素V的檢出限為1.0ug/kg，氨芐西林和阿莫西林的檢出限為2.0ug/kg，加標回收率試驗添加了0.2mg/kg、4.0mg/kg、7.5mg/kg的3個濃度水平，其中青霉素G平均回收率在97.4～101.2％之間，RSD在2.09～2.67％之間；青霉素 V平均回收率在95.0～100.9％之間，RSD在1.70～3.92％之間；氨芐西林平均回收率在96.1～99.7％之間，RSD在1.98～3.73％

6、之間；阿莫西林平均回收率在93.3～98.8％之間，RSD在3.19～6.04％之間,并按照國家標準起草程序實現(xiàn)標準化，形成河北省地方標準（DB13/T1384.1-2011）。
　　本論文建立了豬肉中17種磺胺類藥物(磺胺甲氧噠嗪、磺胺甲噻唑、磺胺二甲異惡唑、磺胺間二甲氧嘧啶、磺胺甲基異惡唑、磺胺苯吡唑、磺胺甲基嘧啶、甲氧芐氨嘧啶、磺胺醋酰、磺胺二甲嘧啶、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺對甲氧嘧啶、磺胺喹惡啉、磺胺吡啶、磺胺二甲氧噠嗪、

7、磺胺多辛、磺胺嘧啶)及4種N-乙酰化代謝產物(N-乙?；前范奏奏?、N-乙酰磺胺甲惡唑、N-乙酰磺胺甲嘧啶、N-乙?；前粪奏?的超快速液相色譜-串聯(lián)質譜的檢測方法。樣品通過乙酸乙酯超聲提取，固相萃取柱凈化，氮吹濃縮后，超快速液相色譜分離，串聯(lián)質譜檢測。本方法在1μg/kg～200μg/kg范圍內各化合物線性良好，線性相關系數(shù) r均大于0.998，檢出限為0.1μg/kg～0.5μg/kg，方法在3個水平的添加回收率在68.3％～104.

8、4％之間，相對標準偏差在3.93％～9.25％之間。
　　本論文在前期建立嬰幼兒奶粉中6種雌激素檢測方法的基礎上，對已烯雌酚、17α-乙炔基雌二醇、17α-雌二醇、17β-雌二醇、雌三醇和雌酮的六種雌激素殘留的氣相色譜-質譜機理進行深入解析。研究內容主要包括兩方面：其一為雌激素總離子流圖的分析，通過優(yōu)化色譜條件，實現(xiàn)6種待測物特征峰得到很好的分開，特別是雌二醇的兩種同分異構體得到較好分離，從空白基質加標圖看出目標峰與干擾峰分離較好

9、；其二為質譜裂解的解析，分析了6種目標物的正離子和負離子模式的電子轟擊原理，發(fā)現(xiàn)了己烯雌酚與其他5種物質裂解機理的不同。
　　本論文建立采用高效液相色譜法對塑料食品包裝材料中雙酚A向食品模擬物遷移量的檢測方法。實驗使用4種食品模擬物：水、質量分數(shù)為4％乙酸溶液、體積分數(shù)30％的乙醇溶液和脂肪類模擬物(正己烷、異辛烷和橄欖油)。結果表明，雙酚 A在與食品塑料包裝接觸過程中，無論在何種情況下都會向食品模擬物中遷移，尤其向醇類模擬物中遷

10、移最嚴重；在溫度超過60℃時，雙酚 A向食品模擬物中的遷移率驟增；在微波加熱的情況下，尤其是大功率下雙酚 A向食品模擬物中的遷移速率最快。該方法檢測限為0.3ng/mL，線性范圍為0.5～100ng/mL，線性相關系數(shù)為0.9997，回收率在92.0％～102.4％之間，相對標準偏差≤2.84(n=5)。
　　上述建立的檢測方法同時具體靈敏、快速、高通量、準確可靠的特點，適用于食品鏈中激素與抗生素類藥物殘留的定性、定量及確證檢測，