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文檔簡介
1、大米儲(chǔ)藏過程中-SH易氧化成-S-S-,從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象發(fā)生變化,蛋白質(zhì)沉降系數(shù)和平均分子質(zhì)量明顯增大,蛋白質(zhì)的提取率下降。其中,谷蛋白占大米蛋白總量的80%左右,其不溶于水的性質(zhì)限制了大米蛋白的進(jìn)一步開發(fā)利用。
本文以早秈陳米為原料,對(duì)還原劑-堿法復(fù)合提取大米蛋白的工藝條件、大米蛋白的酶法改性和還原劑-酸法改性等進(jìn)行了系統(tǒng)研究,旨在通過還原劑-堿法提高大米蛋白的提取率,對(duì)其進(jìn)行蛋白酶法和還原劑-酸法改性,以提高大
2、米蛋白的溶解性,增加其實(shí)際應(yīng)用范圍。主要研究結(jié)果如下:
為提高大米蛋白的提取率,本文提出了用還原劑-堿法復(fù)合提取大米蛋白的思路。大米蛋白提取過程中使用還原劑亞硫酸鈉、二硫蘇糖醇可以使陳米蛋白質(zhì)分子中的-S-S-還原成-SH,增加可溶性蛋白質(zhì)的溶出,從而提高大米蛋白的提取率。還原劑-堿法復(fù)合提取大米蛋白的最佳提取工藝和條件為:NaOH濃度0.05mol/L,Na2SO3用量為0.50%,DTT用量為2.50%,固液比1∶12
3、,35℃提取4h,大米蛋白的提取率為95.26%。還原劑-堿法復(fù)合提取工藝與傳統(tǒng)堿法提取工藝相比,不僅提高了大米蛋白的提取率,保護(hù)了大米中的淀粉并且降低了堿液濃度,減少對(duì)環(huán)境的破壞。
由于大米蛋白的溶解性差,以提高其溶解性為主要目的,在對(duì)大米蛋白提取研究的基礎(chǔ)上,本文對(duì)其進(jìn)行了系統(tǒng)的改性研究,改性方法采用生物酶法和還原劑-酸法兩種方法。酶法改性選擇胰蛋白酶,考察大米蛋白用量、胰蛋白酶用量、酶解時(shí)間等主要影響因素對(duì)大米蛋白水
4、解產(chǎn)物的溶解度和水解度的影響,確定酶法改性大米蛋白的最佳工藝和條件:大米蛋白用量3.00%,胰蛋白酶占大米蛋白用量5.00%,在溫度50℃,pH8.0下作用2.50h,在此試驗(yàn)條件下,大米蛋白酶水解產(chǎn)物的溶解度為83.65%,水解度為2.87%。HPLC分析表明,大米蛋白經(jīng)胰蛋白酶改性后其相對(duì)分子質(zhì)量顯著變小,降解成小分子的肽類物質(zhì),從而提高了大米蛋白的溶解度。
其次,研究了大米蛋白的還原劑-酸法復(fù)合改性,以高純度大米蛋白
5、為原料,加入二硫蘇糖醇、鹽酸對(duì)大米蛋白進(jìn)行改性,考察鹽酸濃度、大米蛋白用量、DTT用量、溫度、時(shí)間等因素對(duì)大米蛋白水解產(chǎn)物的溶解度和水解度的影響,通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)確定還原劑-酸法改性大米蛋白的最佳工藝和條件:鹽酸濃度為0.60mol/L,大米蛋白用量為2.50%,DTT用量為0.60%,反應(yīng)溫度為90℃,反應(yīng)時(shí)間2.0h,在此試驗(yàn)條件下,大米蛋白水解產(chǎn)物的溶解度為95.37%,水解度為5.21%。與傳統(tǒng)酸法改性相比,還原劑-酸法
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