基于LC--MS與單分子熒光的肉類中混合污染物的檢測.pdf

1、在眾多類別的動物源食品中，肉類產(chǎn)品占有重要的地位。鑒于混合污染物會在肉類產(chǎn)品的生產(chǎn)、貯存以及運(yùn)輸過程中不斷累積，并經(jīng)由食物鏈富集作用威脅人類健康，發(fā)展快速可靠的混合污染物的篩查方法對農(nóng)業(yè)發(fā)展和食品安全有著重要的意義。
　　本實(shí)驗(yàn)建立了一種基于QuEChERs前處理方法，并利用LC-Q-TOF/MS檢測雞肉中126種農(nóng)藥殘留的技術(shù)。該實(shí)驗(yàn)的主要步驟如下:(a)提取:以乙腈作為提取溶劑，采用先均質(zhì)后振蕩的提取方式提取雞肉樣品;(b)凈

2、化:通過比較添加不同的吸附劑組合(EMR-Lipid，PSA，C18，PSA+C18，PSA+C18+GCB)評估分散固相萃取(d-SPE)的凈化效率;(c)色譜質(zhì)譜檢測:采用配有反相色譜柱的液相色譜和外標(biāo)法進(jìn)行檢測。最終結(jié)果表明，EMR-Lipid是最適合的吸附劑，且超過90％的分析物達(dá)到低于10μg/kg的低檢測限(LOQs)。在0.05，0.10和0.20mg/kg添加三個濃度上對回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSDs)進(jìn)行評估。在添加濃

3、度為0.20mg/kg時，加標(biāo)回收率在70-120％范圍內(nèi)，大多數(shù)農(nóng)藥的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)值小于15％。該方法中標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)范圍為0.9843（氟氯洛酮）至0.9999（環(huán)丙嘧啶）。該檢測方法具有快速、高通量、高精度等優(yōu)勢，能夠廣泛應(yīng)用于雞肉中多種農(nóng)藥殘留的檢測。
　　此外，本實(shí)驗(yàn)建立了一種基于單分子熒光檢測豬肉樣品中PCB-77殘留的技術(shù)。該實(shí)驗(yàn)的主要步驟如下:(a)玻片的修飾:將生物素和鏈霉親和素分別修飾在玻片表面，

4、用以固定核酸探針;(b)反應(yīng)體系的設(shè)計:帶有生物素標(biāo)記捕獲探針的能夠固定在飾后的玻片表面，用于封閉捕獲探針的適配體能與PCB-77特異性結(jié)合，當(dāng)反應(yīng)體系中存在PCB-77時，適配體將會從捕獲探針脫離下來，此時，熒光探針能與暴露的捕獲探針非穩(wěn)態(tài)結(jié)合，從而產(chǎn)生熒光態(tài)的變化;(c)PCB-77的檢測:采用全內(nèi)反射顯微鏡觀察單分子位點(diǎn)的熒光變化，根據(jù)單分子位點(diǎn)個數(shù)和體系中PCB-77的濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，實(shí)現(xiàn)PCB-77的定量。最終結(jié)果表明，在緩