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1、安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文蘇云金芽孢桿菌晶體殺蟲蛋白Cry1Ac基因在蟲生真菌球孢白僵勞中的表達(dá)姓名:劉振邦申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):森林保護(hù)學(xué)指導(dǎo)教師:李增智黃勃201106IIAbstractFungalinsecticidesisastofenvironmentalfriendlyenvironmentallysafebiopesticidewithgoodsafetytohumanvertebratesnontargetinvert
2、ebratessubstantialsustainablecontroleffecteasinessofmassproductionwithartificialmedia.Ontheotherhtheyaresubjectedeasilytoenvironmentalfactskillinsectsslowlynotsteadilywhichhasconstrainedthedevelopmentoftheuseofthefungi.M
3、oleculerpathogenicmechanismshavebeenstudiedindertothevirulentgeneswhichcanbeimprovedbygeneengineering.Bacillusthuringiensisisgrampositivebacteriumoneofkindswhichcanfmparaspalcrystalprotein(insecticidalcrystalproteinICP)δ
4、endotoxininthestabilityofthebacteriagrowth.Itisstrongpoisonousfcespeedingdeadlyfpeststhatisavirulententomopathogenfthenaturalenemyofpests.Cry1AcgeneofB.thuringiensisisanimptantvirulentgenebutitisunknownwhetheritcanenhanc
5、ethevirulenceofafungus.InthepresentstudytheexogenousCry1AcwastransferredintotwowildtypeisolatesofBeauveriabassianaonefromtheMasson’rpillerDendrolimuspunctatusanotherfromtheAsiancnberOstriniafurcanalis,toconstitutetwogene
6、engineeredstrainswithonecopiedoverexpressedCry1Ac.AvectofpbarGPE1Cry1AccontainingtheingmarkerbargeneexogenousgeneCry1AcwasconstoitutedthentransferredintoRCEF0013RCEF3383byblastospetranfmmethod.Transfmantswerederivedthrou
7、ghsievingonSDAYmediumcontaining100?gmlglufosinateammoniumresultinginthemonovalentCry1ActransgenicengineeredstrainsRCEF0013G1RCEF3383G1.TheCry1Acgenewasoverexpressedwiththeengineeredstrains.TheresultofbioassayfDendrolimus
8、punctatusshowedthatascomparedtothewildtypeisolateRCEF0013theLC25ofRCEF0013G1tothepinecaterpillarsdecreasedby5.4foldstheLD25reducedby7.1timesLT50shtenedby2.2dindicatingasubstantialvirulenceenhancement.Comparedtospraytreat
9、mentthecumulativemtalityoffeedingtreatmentfeedingwithspraytreatmentwereincreasedby55.6%63.0%LT50shtenedby4.5ddays5.3ddays.ThesedataindicatedthatthestomachtoxicityofBtdeltaendotoxingeneenhancedthevirulenceofB.bassianagrea
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