濟(jì)南地區(qū)鴨源新城疫病毒的分離鑒定及F基因變異分析.pdf

1、鴨新城疫是由新城疫病毒引起的一類急性、高度接觸性和致死性的傳染病。該病以腹瀉和神經(jīng)癥狀，腺胃黏膜局灶性出血或潰瘍，腸道黏膜棗核樣出血及胰腺或脾臟有白色壞死點(diǎn)為主要特征。新城疫病毒對(duì)水禽的致病力在逐漸增強(qiáng)，水禽不僅是新城疫的宿主和儲(chǔ)存庫(kù)，而且成為新城疫病毒的易感禽類。新城疫病毒長(zhǎng)期以來一直是危害我國(guó)養(yǎng)禽業(yè)的主要病原之一。新城疫病毒主要引起雞的新城疫、鵝源新城疫、鴿源新城疫等，但近年來新城疫病毒感染并致病的宿主范圍有擴(kuò)大的趨勢(shì)。且有報(bào)道顯示

2、，不同禽源的新城疫病毒分離株的毒力及其相關(guān)毒力基因、免疫原活性和致病性等生物學(xué)特性并非完全一致。所以進(jìn)行對(duì)新城疫各種不同禽源分離毒株的主要生物學(xué)特性的研究，有利于探索該病毒在不同禽類之間感染與傳播的機(jī)制、病毒的進(jìn)化機(jī)制及其疾病的流行病學(xué)調(diào)查等方面的研究。
　　 近年來，鴨新城疫的感染呈上升趨勢(shì)，將對(duì)我國(guó)的養(yǎng)鴨業(yè)產(chǎn)生巨大危害。加強(qiáng)對(duì)鴨新城疫病毒的研究，對(duì)預(yù)防和控制鴨新城疫的流行，保護(hù)和促進(jìn)我國(guó)養(yǎng)鴨業(yè)的健康發(fā)展具有重要意義。

3、　　 本研究是從濟(jì)南地區(qū)鴨病料中分離得到三株鴨新城疫病毒。通過RT-PCR技術(shù)對(duì)這三株鴨新城疫病毒的F基因進(jìn)行擴(kuò)增，并進(jìn)行序列測(cè)定，分析測(cè)序結(jié)果。并與GeneBank上已發(fā)表的新城疫病毒序列和傳統(tǒng)疫苗株基因進(jìn)行核酸同源性比較、遺傳進(jìn)化樹分析，從而在分子生物學(xué)水平上分析濟(jì)南地區(qū)鴨源新城疫病毒分離株之間的親緣關(guān)系以及與其它地區(qū)流行毒株之間的親緣關(guān)系，為該病的防控提供理論依據(jù)。
　　 在濟(jì)南地區(qū)從臨床疑似新城疫癥狀的鴨中解剖收集病料

4、，雞胚盲傳三代分離得到三株病毒，按常規(guī)方法進(jìn)行血凝試驗(yàn)(HA)和血凝抑制試驗(yàn)(HI)，結(jié)果顯示該三株病毒均具有血凝特性，且血凝特性能被NDV陽性血清所抑制，而不被H9亞型和H5亞型AIV陽性血清所抑制，通過RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增出特異性目的條帶，因此鑒定為鴨源新城疫病毒，并依次命名為SDJN01、SDJN02、SDJN03株。通過試驗(yàn)測(cè)得鴨胚半數(shù)致死量ELD50為10-7.8-10-8.2，ICPI為1.68-1.74，MDT為50.6h

5、-54.6h。綜合以上生物學(xué)毒力指標(biāo)，表明3株分離毒株均為新城疫強(qiáng)毒株。
　　 采用RT-PCR對(duì)3株分離毒株的F基因進(jìn)行擴(kuò)增和序列測(cè)定分析，結(jié)果表明，3株分離毒株間同源性在98.5％-100％，氨基酸同源性在98.7％-100％之間，與GeneBank上已發(fā)表的與其他鴨源、鵝源NDV同源性為96.0％～98.5％;但與LaSota株的核苷酸同源性為83.9％-84.8％，氨基酸同源性為88.6％-89.2％;遺傳進(jìn)化分析表明，