Tyramine通過PKCθ途徑參與疼痛及機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究TAAR1(Trace amine-associated receptor1)參與三叉神經(jīng)炎性痛的可能機(jī)制；研究TAAR1影響小鼠三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元興奮性的作用及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。
　　方法：應(yīng)用western blotting及immunofluorescence方法，分別檢測(cè)TAAR1在小鼠三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元(TG)的蛋白表達(dá)及細(xì)胞定位，檢測(cè)TAAR1在CFA造模后2天的蛋白表達(dá)水平。應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，研究TAAR1內(nèi)生

2、性配體酪胺(tyramine)對(duì)小鼠小直徑 TG神經(jīng)元興奮性的改變及離子通道機(jī)制。應(yīng)用行為學(xué)方法(Von Frey)，研究TAAR1參與CFA三叉神經(jīng)痛的發(fā)生及其分子機(jī)制。
　　結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明：1)在蛋白水平(western blotting、immunofluorescence)，小鼠TG中有TAAR1受體的表達(dá)，且TAAR1主要在小直徑神經(jīng)元中表達(dá)。2)小鼠三叉神經(jīng)炎性痛模型中 TAAR1受體表達(dá)增多。3)小鼠 TG

3、中TAAR1功能增強(qiáng)后，TG神經(jīng)元興奮性增加。4)TAAR1受體的阻斷劑(EPPTB)、A型鉀電流特異性阻斷劑(4-AP)、PKCθ的阻斷劑(PKCθinhibitor protein)能夠翻轉(zhuǎn)由TAAR1功能增強(qiáng)引起的細(xì)胞興奮性增加作用。5)行為學(xué)結(jié)果表明：注射0.1μM tyramine后，小鼠在20min出現(xiàn)痛覺過敏，持續(xù)至90min;給予TAAR1受體的阻斷劑(EPPTB)、PKCθ阻斷劑(PKCθinhibitor prote