小鼠胚胎細(xì)胞和體細(xì)胞核移植及原核置換研究.pdf

1、　　細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)的關(guān)系是生物學(xué)的基本問題，核移植和原核置換是研究核質(zhì)關(guān)系的重要方法。迄今為止，哺乳動物的原核置換研究主要在小鼠上進(jìn)行。按照供體細(xì)胞的不同，哺乳動物核移植研究可分為兩種：胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。小鼠是重要的發(fā)育模式動物，在已有的小鼠核移植報(bào)道中，胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植分別采用不同的研究策略。胚胎細(xì)胞核移植一般采用融合的方法，而體細(xì)胞核移植一般采用胞質(zhì)內(nèi)直接注射的方法進(jìn)行。準(zhǔn)確去除受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞核是核移植研

2、究的關(guān)鍵技術(shù)之一，在裝備有Normarski或Hoffmann光學(xué)鏡頭的倒置顯微鏡下可以準(zhǔn)確去除小鼠MⅡ期卵母細(xì)胞的細(xì)胞核。研究表明用適當(dāng)濃度的蔗糖處理小鼠卵母細(xì)胞能準(zhǔn)確去除細(xì)胞核。本論文的主要目的是改進(jìn)和修改小鼠核移植和原核置換的實(shí)驗(yàn)程序，試圖建立新的小鼠核移植和原核置換的可行方法。本論文的主要創(chuàng)新點(diǎn)：1)以小鼠致密桑椹胚卵裂球?yàn)楣w，研究了不同蔗糖濃度處理卵母細(xì)胞對核移植操作時間和重構(gòu)胚體外發(fā)育的影響，進(jìn)一步證明了蔗糖處理去核是一種